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倉鼠Ca-ATP酶試劑盒酶聯(lián)免疫吸附試驗法樣本處理
閱讀:230 發(fā)布時間:2020-5-7倉鼠Ca-ATP酶(Ca-ATPase)試劑盒酶聯(lián)免疫吸附試驗法樣本處理及要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注:標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。