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關(guān)于人甲狀腺過氧化物酶（TPO）elisa酶聯(lián)免疫試劑盒HIV測定過程

1 配液：ELISA試劑盒將50ml濃縮洗刷液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用,。

2 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板設(shè)陰性對照3孔,、陽性對照Ⅰ型、Ⅱ型各1孔，空白對照1孔,。

3 加樣：分別在相應(yīng)孔加入待檢標(biāo)本、陰性,、陽性對照100μl,，用封板膜封板后置37℃溫育30min。

4 洗刷：當(dāng)心把封板膜揭去,，用洗板機(jī)挑選5次程序,，洗板后拍干。 

5 加酶：每孔加酶結(jié)合物100μl（空白對照孔除外）,，充沛混勻,，用封板膜封板后置37℃溫育30min。

6 洗刷：當(dāng)心把封板膜揭去,，用洗板機(jī)挑選5次程序,，洗板后拍干。

7 顯色：每孔加入顯色劑A液和B液各50μl,，悄悄振動(dòng)混勻,，封板后置37℃避光顯色15min。

8 測定：每孔加終止液50μl,，悄悄振動(dòng)混勻,。設(shè)定酶標(biāo)儀波長為450nm（建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參閱波長630 nm）,，空白調(diào)零,，讀取各孔OD值。

9 判斷成果：核算臨界值（cut-off）（CO）值,。 臨界值＝陰性對照A均值＋0.12 正常情況下,，陰性對照孔的OD值≤0.10（若1孔陰性對照的OD值＞0.1應(yīng)放棄,，若有2孔或2孔以上陰性對照的OD值＞0.1，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn),。）,。樣品OD值＜臨界值者為HIV抗體陰性。

正常情況下,，陽性對照孔的OD值≥0.80（若1孔陽性對照的OD值＜0.8應(yīng)放棄,，若有2孔或2孔以上陽性對照的OD值＜0.8，應(yīng)重復(fù)實(shí)驗(yàn),。樣品OD值≥臨界值者為HIV抗體陽性,。 

ELISA試劑盒注意：關(guān)于篩查陽性標(biāo)本，應(yīng)從頭取樣雙孔復(fù)試,，復(fù)試陽性者應(yīng)按照《全國HIV檢測管理規(guī)范》送HIV確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn),。 質(zhì)量操控： 每塊板設(shè)陰陽性及空白對照，并于每次實(shí)驗(yàn)用克己質(zhì)控血清作質(zhì)控,，將質(zhì)控血清孔OD值采用“即刻法"核算或標(biāo)在質(zhì)控圖上,，如質(zhì)控有效，標(biāo)明實(shí)驗(yàn)牢靠,；如失控,，則要查看試劑效期、貯藏溫度,、試 驗(yàn)溫度是否正常,、操作過程是否正確，直至從頭實(shí)驗(yàn)使其在控,。