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人腦紅蛋白（NGB）免疫組化檢測試劑盒操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。

4. 除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6. 每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。

備注：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：2000,、1000,、500、250,、125,、0 pg/mL

2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi)，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當(dāng)有部分樣本值超過大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。