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ELISA可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類為兩種方法,。
閱讀:787 發(fā)布時(shí)間:2019-2-15 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:
(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent),;
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate),;
(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不類型的檢測(cè)方法,。
ELISA試劑盒可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類為以下兩種方法,。
直接法(direct ELISA)
將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體,,即可測(cè)定抗原總量,,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng),。
缺點(diǎn):試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費(fèi)用相對(duì)提高,。
間接法(indirect ELISA)
此測(cè)定方法與直接法類似,,差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量,。
優(yōu)勢(shì):二抗可以加強(qiáng)信號(hào),,而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它*多的免疫反應(yīng)性,。
缺點(diǎn):交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高,。