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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書屬固相免疫測定，抗原,、抗體的只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標(biāo)本,，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗的機(jī)會(huì),，只需zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐,，因此需經(jīng)分散才干到達(dá)反響的結(jié)尾,。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗原的也相同如此。這就是為何ELISA試劑盒反響老是需求必定時(shí)刻的溫育,。
    有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清,，可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,，再在其間參加血清標(biāo)本,，然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以確保混和,。加酶物使用液和底物使用液時(shí)可用定量多道加液器,，使加液進(jìn)程敏捷完結(jié)。在ELISA檢查試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響,，即加標(biāo)本和加酶物后,。抗原抗體反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時(shí)刻,，這一保溫進(jìn)程稱為溫育（incubation）,，有人稱之為孵育，在ELISA檢查試劑盒中似不恰當(dāng),。
    ELISA試劑盒溫育常選用的溫度有43℃,、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等,。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,，也是大多數(shù)抗原抗體的合適溫度。在樹立elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書方法作反響動(dòng)力學(xué)研討時(shí),，實(shí)驗(yàn)標(biāo)明,，兩次抗原抗體反響通常在37℃經(jīng)1-2小時(shí),，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響,，可進(jìn)步反響的溫度,，有些實(shí)驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度,?？乖贵w反響4℃更為*，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中,，以形成zui多的沉積,。但因所需時(shí)刻太長，在Elisa試劑盒中通常不予選用,。

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