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影響elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格檢測結(jié)果分析
閱讀:299 發(fā)布時間:2017-4-11影響elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格檢測結(jié)果的三大條件,,它們分別是標(biāo)本因素,、固相載體、ELISA加樣步驟,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色……
一、標(biāo)本因素
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)留意避免溶血,,紅細(xì)胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,,在間接法ELISA中可使本底加深,。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點,珠式,、管式及磁性球ELSIA,,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,嚴(yán)格遵照劃定操縱,,必能得出正確的結(jié)果,。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,,并留意不可濺出,,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定需用稀的血清,,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣,。
二,、固相載體
ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點,。除特殊情況外,,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測標(biāo)本。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時可用定量多道加液器,,使加液過程迅速完成,。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,,也可用一次性的定量塑料管加樣,。的試劑,良好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格檢測結(jié)果正確可靠的必要條件,。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定,,有些則需經(jīng)預(yù)處理。
三,、ELISA加樣步驟
在ELISA中一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,,加底物,。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,,可上下倒置混和,,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,,再在其加入血清標(biāo)本,,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來,,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,,超過一周測定的需低溫冰存,。可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,,體液,、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份,elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保留,。