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1.進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒包被抗原的選擇

包被抗原可分為天然蛋白,、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,，對于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,，再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板,。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,，一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。

2.包被液的選擇

一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,，如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液,。

3.進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒包被溫度的選擇

通常是4-8度條件下或者37度保溫2小時(shí)，我們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被,，有利于蛋白活性的保持,。

4.包被濃度的選擇

包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,，要明確針對特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過實(shí)驗(yàn)來確定,。

包板后需要封閉嗎?應(yīng)該選擇什么樣的封閉體系?

封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件,。一般說來,，雙抗體夾心法，只要酶標(biāo)記物是高活性的,，操作時(shí)洗滌*,，不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。而在間接法測定中,，封閉一般是*的,。

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒常用的封閉劑有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清,、1%明膠,、5%的脫脂奶粉，AbMART推薦使用5%脫脂奶粉,，價(jià)廉而且封閉能力強(qiáng),，不過5%脫脂奶粉只適合短期內(nèi)使用，不宜長期保存,，所以試劑盒中較少使用,。