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技術(shù)文章

進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗應注意的事項

閱讀:460          發(fā)布時間:2017-3-21

進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗應注意的事項:
1.正式試驗時,,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準確性,。
2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1)固相載體的選擇:目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進行反應,,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒一般多采用4℃ 18~24小時,。
(3)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全,、有明顯地顯色反應,,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,,應注意防護,。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應,。通常底物作用時間,,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入,。
進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒結(jié)果計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度,。

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