類(lèi)器官模型因其能夠再現(xiàn)真實(shí)組織的復(fù)雜性而在生物研究和篩選中越來(lái)越受歡迎,。為了模擬體內(nèi)的人體肺器官,，我們?cè)谟兄?3D 結(jié)構(gòu)形成的條件下培養(yǎng)了原代人肺上皮細(xì)胞，重現(xiàn)了肺氣道形態(tài)和功能上的特征,。在肺類(lèi)器官培養(yǎng)中,，上皮干細(xì)胞和祖細(xì)胞在添加了一系列生長(zhǎng)因子的 ECM 中培養(yǎng)。類(lèi)器官隨后生長(zhǎng)成復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，保留了多系上皮細(xì)胞簇,。這些特性使類(lèi)器官培養(yǎng)成為一種富有前景的手段，可以廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)和轉(zhuǎn)化方法,，如藥物篩選和疾病建模,。
這里我們闡述了一種高內(nèi)涵成像方法，可以監(jiān)測(cè)和可視化肺類(lèi)器官的生長(zhǎng)和分化,，3D 結(jié)構(gòu)的重建,，類(lèi)器官結(jié)構(gòu)的復(fù)雜分析，細(xì)胞形態(tài)和活力,，以及不同細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá),。3D 肺類(lèi)器官植入在 Matrigel domes。發(fā)育中的類(lèi)器官包括具有復(fù)雜形態(tài)的球形物體,，包括腔和膀胱結(jié)構(gòu),。在 8 周的生長(zhǎng)過(guò)程中，我們監(jiān)測(cè)到了大小和復(fù)雜性的增加,。用透射光監(jiān)測(cè)類(lèi)器官,，然后用 20-30 層 Z 軸掃描透過(guò)基質(zhì)凝膠對(duì)染色的類(lèi)器官成像，物鏡倍數(shù)為 10 – 40x,。使 用 ImageXpress® Confocal HT.ai 智能化共聚焦高內(nèi)
 涵成像分析系統(tǒng)新配置的激光光源顯著的提高照明強(qiáng)度,，從而顯著提高了亮度、檢測(cè)靈敏度和成像速度,。