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利用基于HTRF技術(shù)檢測胰高血糖素GLP-1受體的Kd值

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Cisbio 的 Tag-lite HTRF 平臺能 夠 有效 地 用 HTRF 熒 光
團(tuán)標(biāo)記目標(biāo)位點(diǎn)上感興趣的蛋白,。細(xì)胞表面受體可以插
入 SNAP-tag 質(zhì)粒中,,然后用這種結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)染細(xì)胞并表達(dá)
標(biāo)記的受體,。通過添加 snap -lumi4-Tb 底物,,用鋱 (Tb)
穴狀化合物標(biāo)記受體,。為了進(jìn)行結(jié)合試驗(yàn),受體的配體
用 HTRF 受體熒光團(tuán)標(biāo)記,,例如 d2,。當(dāng) d2 配體與鋱標(biāo)
記的受體結(jié)合時(shí),可以使用具備 HTRF 功能的微孔板讀
板機(jī)檢測受體到配體的時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (TRFRET)

 

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