描述 | 6孔板圓形細(xì)胞爬片(直徑24mm)采用的玻片制作,厚度為0.17mm,,有圓形和方形。已處理,,已滅菌,,拆開即用。 采用*玻片表面處理技術(shù)(TC處理→*吸附)可促進(jìn)細(xì)胞在玻片上貼壁生長,,細(xì)胞貼壁牢固,。 即使在后期免疫組化,、免疫熒光、原位雜交處理過程中也不易脫片,,避免傳統(tǒng)方法中從培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到載玻片上的損傷,。使用一步法細(xì)胞爬片不用預(yù)處理,避免在后期處理中細(xì)胞容易脫片等種種問題,。 1,、爬片常用的規(guī)格:圓形(φ24mm、φ20mm,、φ14mm,、φ8mm、φ3mm)方形(φ24*24mm,、φ15*15mm,、φ10*10mm). 2、細(xì)胞爬片雙面經(jīng)過TC處理,,雙面均可使用,,避免了實(shí)驗(yàn)誤差。 3,、TC處理適用于貼壁較好的細(xì)胞,,多聚賴氨酸包被適用于貼壁不好的細(xì)胞比如神經(jīng)細(xì)胞和轉(zhuǎn)染細(xì)胞。 4,、爬片高強(qiáng)度耐酸堿,,特殊實(shí)驗(yàn)浸泡一個星期均不會碎片。 5,、一步法細(xì)胞爬片只需打開包裝即可使用,,節(jié)省成本,節(jié)省實(shí)驗(yàn)員的試驗(yàn)時間,。 6,、經(jīng)過伽馬射線滅菌,無DNA酶,、無RNA酶,、無熱源。 |
使用方法 | 1,、6孔板圓形細(xì)胞爬片(直徑24mm)在超凈臺內(nèi),使用75%乙醇擦拭外包裝鋁箔袋 2,、拆開鋁箔袋,,取出內(nèi)置器皿后,用尖鑷將內(nèi)置爬片取出放入所用培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿內(nèi), 3,、用胰酶消化好細(xì)胞,,充分吹打,使之成單細(xì)胞懸液(注意:這一點(diǎn)很重要,,關(guān)系到將來爬出來片子的質(zhì)量) 4,、種植細(xì)胞時,根據(jù)玻片的大小,,先在每個孔里準(zhǔn)備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基,,目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起,然后放玻片,,防止加細(xì)胞懸液時玻片漂起,,造成雙層細(xì)胞貼片。整個過程注意無菌操作,。 5,、根據(jù)自己的需要選擇合適的細(xì)胞密度種入培養(yǎng)板內(nèi)即可 6、使用細(xì)胞爬片時,,(比如在6孔板鐘放入爬片,,6孔板的孔底面積往往比爬片面積多出一部分,加細(xì)胞懸液時,,常常就是細(xì)胞鋪滿整個孔底,,有時,細(xì)胞生長邊集現(xiàn)象,,就是靠近壁邊緣細(xì)胞密度要高一些,,這樣處于中央細(xì)胞爬片上的細(xì)胞數(shù)量相對較少),比較好的做法是,,將爬片放入孔內(nèi)后,,加細(xì)胞懸液時,只滴到爬片上,,一直滴到液體布滿整個爬片,,但又不易溢出爬片邊緣,放到培養(yǎng)箱里,,等細(xì)胞貼壁后,,取出,再滴加培養(yǎng)基布滿整個孔底,,繼續(xù)培養(yǎng),,這樣爬片上的細(xì)胞生長的密度就會很集中。 7,、細(xì)胞放到爬片上,之后加任何試劑,都應(yīng)沿培養(yǎng)板板壁少量一點(diǎn)點(diǎn)倒入液體,,直到細(xì)胞被液體淹沒,,盡量不要把細(xì)胞沖到細(xì)胞爬片以外! 8,、作用一定時間后取玻片,。取玻片時由于玻片與培養(yǎng)皿底結(jié)合較緊,張力較大,,一般將注射器針頭針尖向背面弄個小鉤,,這樣將爬片輕輕勾起,用小鑷子取出就可以了,。如果要做諸如24h,,48h,72h等這樣時間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)的話,,將所需數(shù)量的爬片取出時應(yīng)用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子,。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng)。 9,、細(xì)胞爬片,,有多層包裝,在超凈臺無菌狀態(tài)下打開包裝,,未用完的爬片按照原先包裝方式再包裝起來即可 10,、爬片表面帶有正電荷,請勿用手觸摸,,以免效果不佳,! |