貼壁細(xì)胞的消化:
1、吸去培養(yǎng)液,,用無菌的 PBS,、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清,。
2,、加入少量胰酶細(xì)胞消化液,略蓋過細(xì)胞即可,,室溫放置 30 秒至 2 分鐘,。不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
3,、顯微鏡下觀察,,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,,或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來此時吸除胰酶細(xì)胞消化液,,加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,,即可直接用于后續(xù)實驗,。
4、如果發(fā)現(xiàn)消化不足,,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化,。
5、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,,未及時吹打細(xì)胞,,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來,。1000-2000g 離心 1 min,,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,,即可用于后續(xù)實驗。
組織的消化:
不同的組織需要消化的時間相差很大,,通常以消化后可以充分打散組織為宜,。