描述 | 12孔板圓形細胞爬片(直徑20mm)細胞爬片采用的玻片制作,,厚度為0.17mm,,有圓形和方形,。已處理,,已滅菌,拆開即用,。 采用*玻片表面處理技術(shù)(TC處理→*吸附)可促進細胞在玻片上貼壁生長,,細胞貼壁牢固。 即使在后期免疫組化,、免疫熒光,、原位雜交處理過程中也不易脫片,避免傳統(tǒng)方法中從培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到載玻片上的損傷,。使用一步法細胞爬片不用預處理,,避免在后期處理中細胞容易脫片等種種問題。 1,、爬片常用的規(guī)格:圓形(φ24mm、φ20mm,、φ14mm,、φ8mm、φ3mm)方形(φ24*24mm,、φ15*15mm,、φ10*10mm). 2、細胞爬片雙面經(jīng)過TC處理,,雙面均可使用,,避免了實驗誤差。 3,、TC處理適用于貼壁較好的細胞,,多聚賴氨酸包被適用于貼壁不好的細胞比如神經(jīng)細胞和轉(zhuǎn)染細胞。 4,、爬片高強度耐酸堿,,特殊實驗浸泡一個星期均不會碎片。 5、一步法細胞爬片只需打開包裝即可使用,,節(jié)省成本,,節(jié)省實驗員的試驗時間。 6,、經(jīng)過伽馬射線滅菌,,無DNA酶、無RNA酶,、無熱源,。 |
使用方法 | 1、在超凈臺內(nèi),,使用75%乙醇擦拭外包裝鋁箔袋 2,、拆開鋁箔袋,取出內(nèi)置器皿后,,用尖鑷將內(nèi)置爬片取出放入所用培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿內(nèi),, 3、用胰酶消化好細胞,,充分吹打,,使之成單細胞懸液(注意:這一點很重要,關(guān)系到將來爬出來片子的質(zhì)量) 4,、種植細胞時,,根據(jù)玻片的大小,先在每個孔里準備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基,,目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起,,然后放玻片,防止加細胞懸液時玻片漂起,,造成雙層細胞貼片,。整個過程注意無菌操作。 5,、根據(jù)自己的需要選擇合適的細胞密度種入培養(yǎng)板內(nèi)即可 6,、使用細胞爬片時,(比如在6孔板鐘放入爬片,,6孔板的孔底面積往往比爬片面積多出一部分,,加細胞懸液時,常常就是細胞鋪滿整個孔底,,有時,,細胞生長邊集現(xiàn)象,就是靠近壁邊緣細胞密度要高一些,,這樣處于中央細胞爬片上的細胞數(shù)量相對較少),,比較好的做法是,將爬片放入孔內(nèi)后,加細胞懸液時,,只滴到爬片上,,一直滴到液體布滿整個爬片,但又不易溢出爬片邊緣,,放到培養(yǎng)箱里,,等細胞貼壁后,取出,,再滴加培養(yǎng)基布滿整個孔底,,繼續(xù)培養(yǎng),這樣爬片上的細胞生長的密度就會很集中,。 7,、細胞放到爬片上,之后加任何試劑,,都應沿培養(yǎng)板板壁少量一點點倒入液體,,直到細胞被液體淹沒,盡量不要把細胞沖到細胞爬片以外,! 8,、作用一定時間后取玻片。取玻片時由于玻片與培養(yǎng)皿底結(jié)合較緊,,張力較大,,一般將注射器針頭針尖向背面弄個小鉤,這樣將爬片輕輕勾起,,用小鑷子取出就可以了,。如果要做諸如24h,48h,,72h等這樣時間點的實驗的話,,將所需數(shù)量的爬片取出時應用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng),。 9,、細胞爬片,,有多層包裝,,在超凈臺無菌狀態(tài)下打開包裝,未用完的爬片按照原先包裝方式再包裝起來即可 10,、爬片表面帶有正電荷,,請勿用手觸摸,以免效果不佳,! |