ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,酶聯(lián)免疫吸附測定)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學檢測技術(shù),,利用酶標記的抗體或抗原,,通過酶催化的顯色反應檢測目標分子(如蛋白質(zhì)、抗體,、激素等)的存在和含量,。
基本原理:
1、抗原-抗體特異性結(jié)合:利用抗體識別特定抗原,,或抗原結(jié)合特定抗體,。可以分為直接法,、間接法,、夾心法、競爭法,;
2,、酶標記和顯色反應:結(jié)合特定酶(如辣根過氧化物酶HRP或堿性磷酸酶AP),通過底物反應產(chǎn)生可檢測的顏色變化,;
3,、定量分析:通過比色法測定光吸收值,與標準曲線比較,,計算待測物的濃度,。
檢測激素的ELISA試劑盒類型
檢測原理 | 適用激素類型 | 激素名字 |
雙抗體夾心法 | 大分子肽類/蛋白質(zhì)激素 | Insulin(胰島素)、GH(生長激素),、TSH(促甲狀腺素),、FSH(促卵泡素),、LH(促黃體生成素) |
競爭法 | 小分子激素(類固醇) | T(睪酮)、E2(雌二醇),、PROG(孕酮),、MT(褪黑素)、 PGF2α(前列腺素) |
樣本處理:
血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或 4℃過夜,,然后 1000×g離心 20 分鐘,,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應避免反復凍融,。
血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于 2-8℃1000×g離心 15 分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃℃保存,但應避免反復凍融,。
組織勻漿:用預冷的 PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織碎,。將碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,,比如 1g 的組織樣品對應 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融,。最后將勻漿液于 5000×g離心 5~10 分鐘,,取上清檢測。
細胞裂解液:貼壁細胞用預冷 PBS 輕輕清洗,,然后用胰蛋白酶消化,,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細胞可直接離心收集,。收集的細胞用預冷PBS 清洗 3 次,,每 1×10^6 個細胞中加入 150-200uL PBS 重懸(推薦在PBS 中加入蛋白酶抑制劑;若含量很低可適當減少 PBS 體積)并通過反復凍融或超聲使細胞破碎,。將提取液于 2-8℃,,1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
細胞培養(yǎng)上清:請 1000×g離心 20 分鐘,,取上清即可檢測,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融,。
其它生物液體:1000xg離心 20分鐘,,取上清即可檢測。
ELISA試劑盒特點:
1,、可測樣本類型多:血清,、血漿、組織,、細胞培養(yǎng)上清等樣本,;
2、高準確度:回收率普遍在90%-115%之間,;
3,、高靈敏度:靈敏度達pg級別,R2大于99,。
產(chǎn)品推薦清單
貨號 | 名稱 | 樣本類型 | 規(guī)格 |
abs551029 | Human FSH ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,,血漿 | 96T |
abs551134 | Human GC ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,血漿,,組織勻漿,,尿液,唾液,,其他生物樣品 | 96T |
abs551009 | Human Growth Hormone ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,血漿 | 96T |
abs551113 | Human Leptin ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,,血漿 | 96T |
abs551028 | Human LH ELISA Kit | 細胞上清液,血清,,血漿 | 96T |
abs551031 | Human TPO ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,血漿 | 96T |
abs552209 | Mouse Leptin ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,,血漿 | 96T |
abs553008 | Rat LH ELISA Kit | 血清,血漿,,組織勻漿,,細胞培養(yǎng)上清,尿液,,唾液,,其他生物液體 | 96T |
abs554114 | Monkey INS ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,血漿,,組織勻漿,,細胞裂解液,其他生物樣品 | 96T |
abs554111 | PROG ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,,血漿,組織勻漿,,其他生物樣品 | 96T |
abs554113 | E2 ELISA Kit | 細胞上清液,,血清,血漿,,組織勻漿,,其他生物樣品 | 96T |
abs554112 | T ELISA Kit | 細胞上清液,血清,,血漿,,組織勻漿,其他生物樣品 | 96T |
abs554160 | PGF2α ELISA Kit | 血清,、血漿 和 其他生物液體 | 96T |
Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC,、IHC、凋亡,、ELISA,、ChIP、Co-IP,、TR-FRET,、生化檢測、殘留檢測,、多因子檢測),;細胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細胞因子),、分化試劑盒,;分子(mRNA合成服務+提取試劑盒);化合物大包裝,;輔助試劑,、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE,、B27,、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE,、百日咳毒素PTX,、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
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