簡(jiǎn)介
多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)（簡(jiǎn)稱多色）基于酪氨酸信號(hào)放大 (Tyramide dignal amplification,，TSA) 技術(shù),，是一類利用辣根過氧化酶 (HRP) 對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法。
帶有染料標(biāo)記的底物酪胺分子在過氧化氫氧化環(huán)境下,，被抗體或探針固定的HRP轉(zhuǎn)化為具有短暫活性的中間狀態(tài),，然后被激活的中間態(tài)分子迅速與相接蛋白分子的富含電子區(qū)域（酪氨酸殘基）進(jìn)行穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合。
圖1 酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(yīng)
為什么選擇多色？多色技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
1,、同時(shí)標(biāo)記多種蛋白（最多9標(biāo)10色）,；
2、一抗來源不再受限（同種屬多標(biāo)）,；
3,、連接辣根過氧化物酶的同種屬二抗；
4,、強(qiáng)熒光防淬滅,。
本期主要講解客戶對(duì)說明書的一些疑惑，說明書常見問題一網(wǎng)打盡?。,。?/strong>
圖2 愛必信多色試劑盒
重要提示?。,。?/strong>
新的一年愛必信部分多色試劑盒染料和抗體更新,，例如舊版本TSA520外觀是白色透明,，新版本是黃色，老用戶不要誤會(huì)染料質(zhì)量問題,！
版本更新之后,，新舊試劑盒請(qǐng)不要摻雜，試劑盒需配套使用,！
圖3 新版染料TSA520
愛必信多色試劑盒說明書問題解析
1,、脫蠟水合步驟中“10%中性福爾馬林浸片10min，滅菌水洗片1min,，重復(fù)3次"目的是什么,？我們以前做石蠟切片的時(shí)候沒有這一步。
答：這是后固定的步驟,，固定充分的組織可以省略此步,。
2、微波修復(fù)抗原每一輪染色都要做嗎,？可以用抗體洗脫液替代嗎,？抗體洗脫液用在哪個(gè)步驟？
答：染第一個(gè)抗體之前做抗原修復(fù),，是為了使被石蠟或者固定劑封閉的抗原決定簇重新暴露出來,，使得抗體能夠識(shí)別到抗原；在染后面每一個(gè)抗體之前的抗原修復(fù),，目的是為了去除掉上一輪染色的抗體和殘留沒有結(jié)合上的染料,，其實(shí)更準(zhǔn)確的叫法是“抗體洗脫",，也就是說第一次的抗原修復(fù)是真正的抗原修復(fù)，后面的抗原修復(fù)實(shí)際上是“抗體洗脫",，“抗體洗脫"可以用抗體洗脫液(abs994)替換,，特別是細(xì)胞、冰凍切片或者骨樣本,，但第一次抗原修復(fù)不能被抗體洗脫液替代,，冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)，染色效果欠佳時(shí),，可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù),，推薦冰凍切片快速抗原修復(fù)液(5×)(abs9207)。
3,、需要進(jìn)行內(nèi)源性過氧化氫封閉嗎,？在哪一步進(jìn)行,？是每輪都要做嗎,？
答：需要進(jìn)行內(nèi)源性過氧化氫封閉，詳細(xì)的步驟是在血清封閉之前,，3%的過氧化氫甲醇溶液室溫封閉10-15min,，PBST洗三遍，再加血清封閉,，過氧化氫封閉做一次就好了,。
4、染DAPI之前是否還需要進(jìn)行抗原修復(fù)（指抗體洗脫）,？
答：理論上是需要的,，但是如果是冰凍切片經(jīng)過多輪洗脫之后，有很大的脫片風(fēng)險(xiǎn),，這種情況下,，寧愿背景不太干凈，也不希望脫片,，這一步可以不進(jìn)行抗原修復(fù),。
多色試劑盒買二送一！??！ 活動(dòng)時(shí)間：2024年2月20日-3月31日
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好消息！Absin文獻(xiàn)獎(jiǎng)勵(lì)重磅升級(jí),！
Absin特色產(chǎn)品線：
WB相關(guān)：ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker、預(yù)制膠,；IHC相關(guān)：二抗試劑盒,、組化筆,；IP/CoIP試劑盒；激動(dòng)劑/抑制劑,；血清,、BSA、蛋白酶K,、CTB,、TTX、CEE,；凋亡試劑盒,；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒,；重組蛋白,；抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體,、對(duì)照抗體,；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
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