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答：我們查閱大量文獻(xiàn),，構(gòu)建原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移癌的類器官都是用的適合原發(fā)腫瘤的類器官培養(yǎng)基，比如腸癌的原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶,，乳腺癌的原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶,，所以用原發(fā)部位的癌類器官培養(yǎng)基比較好。

答：轉(zhuǎn)移性的類器官形態(tài)和原發(fā)性的比較像,。

答：類器官長(zhǎng)的比較大的話,，50-100um之間加藥就可以了,；長(zhǎng)的比較小的類器官50um左右就行了。一般傳代后2-3天,，就可以加藥,，加藥再培養(yǎng)3-4天可以檢測(cè)。

答：直接放在冰上30min,，凝固后直接放在70%乙醇里，4℃過(guò)夜,。

答：可以用組織凍存液梯度凍存放液氮，等條件成熟再?gòu)?fù)蘇培養(yǎng)即可,。

答：和惡性積液的方法類似，離心回收細(xì)胞,，包埋基質(zhì)膠,，加類器官培養(yǎng)基。

答：不管是哪種污染,，細(xì)菌，霉菌,，類器官都必須舍棄,，同時(shí)往培養(yǎng)皿中倒入84等消殺試劑，防止傳播,。

答：流式分選是可以的,，也直接挑取你要的類器官擴(kuò)增即可,。一般類器官長(zhǎng)到100um肉眼是可見(jiàn)的，直接超凈臺(tái)上,，使用200μL移液槍頭直接挑下來(lái)類器官,，然后進(jìn)行傳代操作。

答：所以一般鋪板后,，不會(huì)馬上做藥篩，會(huì)養(yǎng)1~2輪換液周期（3~6天）從新評(píng)估各個(gè)孔的情況,，選取合適的孔做實(shí)驗(yàn),。

答：有些24h,，有些48h，比如化療藥,，每種藥的時(shí)間點(diǎn)是不一樣的,，要根據(jù)自己要做的藥物，摸一下時(shí)間梯度,。

答：排除掉培養(yǎng)操作技能的影響，肝實(shí)質(zhì)癌類器官,，對(duì)于未治療的肝癌組織培養(yǎng)成功率相比治療過(guò)的成功率高,，可能經(jīng)過(guò)治療后的肝癌細(xì)胞活性降低，同時(shí)也和營(yíng)養(yǎng)體系的優(yōu)化等有一定關(guān)系,。

今天講解就到這了,，大家如有實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，歡迎入群交流哦,！

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