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mRNA（信使RNA）轉染是一種將外源mRNA引入細胞內的技術，以實現特定蛋白質的表達或基因治療的方法,。mRNA轉染可以繞過基因組中的DNA轉錄和核糖體轉錄過程，直接將所需的mRNA傳遞到細胞內，從而實現蛋白質的合成,。

使用mRNA轉染技術有多種優(yōu)勢：

1）相比于DNA轉染,，mRNA轉染不需要經過核轉錄和DNA復制等步驟，可以更快速地實現蛋白質的合成,；
2）由于mRNA轉染不涉及基因組的改變，避免了可能引發(fā)的不良基因突變和免疫應答等問題,；
3）mRNA轉染還具有可調控性強、轉染效率高以及適用范圍廣等優(yōu)點,。

在實際應用中,，mRNA轉染被廣泛用于基因治療、疫苗研發(fā)以及細胞工程等領域,。mRNA轉染試劑（abs60339）是愛必信推出的專為真核細胞進行mRNA轉染開發(fā)的mRNA專用轉染試劑,，可用于在多種貼壁細胞或懸浮細胞中遞送mRNA。可直接將mRNA從細胞外傳遞到細胞質中進行表達,，這避免了轉錄調控作用的影響以及進入細胞核的限制,，可被廣泛應用于短期蛋白表達的相關研究工作。

產品亮點：

? 專用于mRNA轉染,，可用于多種貼壁細胞或懸浮細胞,；
? 在各種常規(guī)細胞、難轉的原代細胞或干細胞中均具有較高的轉染效率,；
? 不受血清影響,，轉染前后無需更換培養(yǎng)基,；
? 產品性能穩(wěn)定,，毒性低,，操作簡單，重復性好,。

實驗操作步驟：

以24孔板為例：

1）細胞接種：每孔接種0.5-1.0×10⁵個細胞,，細胞培養(yǎng)12-24小時，使轉染時細胞密度達到60-70%融合度,；
2）mRNA稀釋：將mRNA稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中,，終濃度0.1mg/mL；
3）復合物制備：取2uL的mRNA轉染試劑原液加入到8uL Opti-MEM培養(yǎng)基中,，取4uL濃度為0.1mg/mL的mRNA加入到6uL Opti-MEM培養(yǎng)基中,，兩者等體積混合；
4）室溫靜置10分鐘,；
5）無需等待,，每孔20uL復合物加入細胞培養(yǎng)板中，混勻,，37℃培養(yǎng)18-48小時后檢測基因表達,，無需更換培養(yǎng)基,。

實驗案例展示：

1、適用范圍廣泛：使用Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）在不同類型細胞包括293T細胞,、B16F10細胞、MCF-7細胞,、LX2細胞,、MC38細胞,、LLC細胞、MDA-MB-231細胞,、Jurkat細胞中轉染EGFP mRNA，處理細胞24h后利用熒光顯微鏡拍照,，發(fā)現Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）在各類細胞中均取得了較好的轉染效果。

圖1 mRNA轉染試劑（abs60339）轉染EGFP mRNA至各種類型類細胞

2,、轉染效率高：使用Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）和不同競品mRNA轉染試劑在B16F10細胞中轉染EGFP mRNA，處理細胞24h后,，利用流式細胞儀檢測EGFP mRNA的轉染效率。結果表明不同比例的Abisn mRNA轉染試劑（abs60339）轉染效率均高于競品轉染試劑,。

圖2 mRNA轉染試劑（abs60339）不用轉染試劑轉染效率對比結果

備注：圖例中不同柱子顏色代表轉染試劑和mRNA的比例[轉染試劑體積（μL）:mRNA的質量（μg）]，縱坐標的數值代表轉染效率,。

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Absin特色產品線：

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