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人神經(jīng)母細胞瘤細胞（SH-SY5Y） 是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細胞瘤 SK-N-SH細胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞的密度可高達106 cells/cm2,，具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性,。基本形態(tài)上皮樣,，多數(shù)貼壁,，少數(shù)懸浮,； 營養(yǎng)體系：推薦DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244）,。

表1 SH-SY5Y細胞基本信息

圖1 SH-SY5Y（人神經(jīng)母細胞瘤細胞）

首先,，我們討論的是SY5Y五天傳一代算不算正常,？SH-SY5Y 增殖緩慢，再加上喜歡聚團生長,，鏡下觀察融合率不高,，但細胞簇實際密度大，需要5-7天才能達到80%以上的融合率,，所以5-7天傳一代很正常（如圖2所示,，融合率約為70%的SY5Y）。如果細胞培養(yǎng)達到一周都無法傳代,，建議把細胞消化下來,，接種到更小的孔板中，增加細胞密度,，促進細胞生長。

接下來我們討論第二個話題SY5Y懸浮細胞過多正不正常,？SY5Y的生長特點為大部分貼壁,，呈上皮樣，有短觸角延伸出來,，傾向于成簇生長,，容易成團；少部分懸浮,，圓潤有光澤,。 如果SY5Y出現(xiàn)大量懸浮是不正常現(xiàn)象。如圖3所示,，懸浮細胞居多的SY5Y,。

圖2 懸浮細胞居多的SY5Y

如何解決這種情況呢？如果貼壁細胞生長狀態(tài)良好,、密度適中,，可以舍棄懸浮細胞；如果貼壁細胞很少,，用胰酶消化并離心,，將細胞用新鮮的完培重懸并接種到培養(yǎng)瓶，隔段時間觀察細胞是否貼壁,。

最后我們討論一下不同營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y形態(tài)差異大不大,。我們對比了兩種營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y細胞形態(tài)。體系一是DMEM+20%FBS-熱滅活,，體系2是DMEM-F12 + 10%FBS（如圖4所示）,。在培養(yǎng)的第2天和第5天進行了相應(yīng)的形態(tài)比較。傳代第2天,，低密度下,，兩種營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y形態(tài)沒有明顯區(qū)別，均為少數(shù)懸浮,，多數(shù)呈上皮樣,，有短觸角延伸出來，傾向于聚團生長,；傳代第5天,，體系2培養(yǎng)的SY5Y團塊話過于嚴重，細胞黏在一起,，細胞輪廓難以分辨清楚,，體系1細胞有略微聚團（SY5Y本身有聚團生長特性），細胞形態(tài)正常,。體系1更適合細胞增殖,。

圖3 兩種營養(yǎng)體系培養(yǎng)的SY5Y形態(tài)對比圖（兩種營養(yǎng)體系所用血清批號一致）

本期講解就到這里了，下一期您想了解哪種細胞的培養(yǎng)攻略呢,？歡迎留言評論哦,。如有細胞培養(yǎng)問題,，歡迎掃碼加我微信哦,。

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