日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

　　做貼壁細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)，經(jīng)常需要做細(xì)胞鋪板,。這個實(shí)驗(yàn)看似簡單，其實(shí)也不是那么好做的,。關(guān)鍵是要鋪得均勻鋪得平整,，要是中間密周圍稀，或者周圍密中間禿頂,，那就露怯啦,。

　　收集細(xì)胞要混勻

　　消化后的細(xì)胞一定要充分混勻，要把聚在一起的細(xì)胞團(tuán)充分地吹打開,，最好是單個的狀態(tài)，但同時又不能損傷細(xì)胞,，可以用玻璃吸管的移液器操作,。離心也很有講究，一般用1000 rpm/min即可,。離心力太大細(xì)胞容易抱團(tuán),！然后懸浮離心后的細(xì)胞團(tuán)時,，先不要把所有液體都加進(jìn)去,！一般先加2mL液體，然后用1mL移液器輕輕將細(xì)胞吹起,，細(xì)胞要像云霧一樣散開,，這樣易于形成單細(xì)胞。

　　接種細(xì)胞須小心

　　鋪6孔板,，12孔板或24孔板,，先在每個孔里面加1mL的培養(yǎng)基，晃動使之鋪勻整個孔底,，然后加入1 mL的細(xì)胞懸液,。從孔的左邊靠近底部慢慢加入,，這樣細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，細(xì)胞分散較均勻,，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下,。這里又有一個竅門，放在顯微鏡的載物臺上面,。因?yàn)轱@微鏡的載物臺是水平校正過的,，比什么桌面、超凈臺什么的要平多了,。在載物臺上放置20-30分鐘,，細(xì)胞不差這一會溫度和二氧化碳的，等細(xì)胞貼壁了,，輕輕移入到孵箱中,。

　　鋪96孔板，我每孔是加100微升細(xì)胞懸液,，加完半邊板48孔后,，將剩下的未加的細(xì)胞懸液再混一下，再繼續(xù)加剩余的半邊板子,，都加完后蓋上蓋子,，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣,，注意把握力度,，敲三次即可，太大力或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,。也有人推薦輕微的左三圈,、右三圈、前三圈,、后三圈,。

　　輕輕敲打勿抱團(tuán)

　　細(xì)胞懸液加完后，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高,，對著燈光，從底部往上看,，看細(xì)胞有沒有抱團(tuán),。如果有抱團(tuán)的話，用手指從底部輕輕敲打,，使之分散,。也可以用平板振蕩器稍稍振蕩一下，效果不錯,。參數(shù)要設(shè)置成振幅小而頻率高哈,。

　　十字交叉要水平

　　觀察和敲打后放入培養(yǎng)箱,，然后畫“十字”，就是把細(xì)胞培養(yǎng)板貼著培養(yǎng)箱擱板,，前后方向來回晃動10次,，再左右方向晃動10次，正好是一個“十” 字形,。然后就讓它靜靜地呆在培養(yǎng)箱擱板上,，沒事不要去動它。這里要注意的是,，托架應(yīng)該裝在四根立柱相同高度的孔上,，培養(yǎng)箱的擱板要水平校正，盡量地做到水平,。擱板會向一個方向傾斜,，對于貼壁時間長的細(xì)胞，就算當(dāng)時混勻了,，放進(jìn)培養(yǎng)箱后也搖勻了,，但是重力作用下細(xì)胞也會向一側(cè)聚集。 培養(yǎng)箱里面或者外面盡量不要放可以產(chǎn)生振動的儀器,，比如蠕動泵,、離心機(jī)、渦旋器一類的儀器,。這些儀器產(chǎn)生的振動對細(xì)胞貼壁有影響,，也可能會導(dǎo)致細(xì)胞貼壁不均勻。

　　細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,，在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動物),。培養(yǎng)物是單個細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時都要生活在人工環(huán)境中,，由于環(huán)境的改變,，細(xì)胞的移動或受一些其他因素的影響，培養(yǎng)時間加長,，傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型,。