日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

在ELISA實驗中,，最擔心遇到的結(jié)果，莫過于樣本中檢測不到想要的指標,，或者是指標的吸光度落在檢測限之外,，這時候應該怎么做呢？

一,、超出檢測上限

這種情況比較常見于高表達的蛋白,，稀釋了一百倍還是在標準曲線之外，這時候您需要參考相關的文獻,，按照文獻的稀釋倍數(shù)去調(diào)整,，但是因為樣本的不同，文獻的稀釋倍數(shù)也并不一定適合您的樣本,，如果還是超出上限,，繼續(xù)進行稀釋就可以。

二,、低于檢測下限——信號太弱

往往是由于目標蛋白的濃度太低了,，可能是稀釋倍數(shù)太高，也可能是本身目標蛋白含量就比較少,。這種情況主要常見于在健康樣本中對炎癥因子的檢測,，表達含量往往極低。

解決方案：

①首先降低稀釋倍數(shù),，一直降低到能夠檢測到有效的吸光度

②增加抗體的孵育時間,。如果說明書寫著抗體需要在室溫孵育2小時，而得到的結(jié)果不好,，嘗試在室溫兩小時孵育的基礎上再增加4°C孵育過夜,，使得抗體結(jié)合，或增加抗體的量,，說明書上只是推薦的量,，有些樣本可能需要更多的抗體,，進而提高檢測信號。

③將HRP濃度增加50%,，或加倍,，使得它在與TMB顯色底物反應時產(chǎn)生更強的顏色。

④ELISA盒子如果不是拿到手立即做實驗,，保存的時候應該避光保存,，使TMB底物性能。TMB孵育的時候需要把ELISA板放在黑暗中,，因為TMB對光非常敏感,。

⑤如果稀釋倍數(shù)已經(jīng)降低到樣本原液，且做了實驗的優(yōu)化,，依舊不能檢測到,，建議在實驗組別設置中添加陽性對照孔，用明確表達的樣品作為陽性對照,，如果標準曲線及陽性樣品均可測得正常的表達濃度,，則表明實驗成功，其余待測樣品表達含量低于檢測下限,，在表中可記錄為0或標注低于檢測下限,。

如程碧珍等人[1]在用ELISA檢測結(jié)核性胸膜炎患者（實驗組）和非感染性胸膜積液患者（對照組）胸腔積液和血清中的IL-17時，對照組患者胸膜積液中的IL-17水平低于檢測下限,，濃度無法測出,，但實驗組能明顯檢測到，因此將對照組記為△,，標注低于檢測下限,，如圖所示。

如果依舊想要檢測到或者需要做一個比較,，可以選擇靈敏度更高的試劑盒,，更低的檢測下限，就有更大的可能性能夠檢測到目的蛋白,。

如果陽性對照孔都無法測到正常表達濃度,，問題可能就是樣品本身，是否不適用于ELISA實驗,，ELISA樣品一般選擇培養(yǎng)上清,、血清、血漿,，其他樣品形式可能并不適合,，此時就要考慮更換樣品或者更換檢測手段。

Absin高靈敏ELISA試劑盒總表：

擔心浪費樣本,？擔心結(jié)果不理想,？Absin正推出ELISA試劑盒包檢測服務,，將您

的樣本和指標交給我們，我們給您一份滿意的結(jié)果,！快來咨詢獲得更多信息吧~

參考文獻：

[1]    程碧珍,林樹勇,張俏忻,楊禮,蔡應木.IL-17與IL-23免疫軸在結(jié)核性胸膜炎免疫致病機制中的作用[J].中國校醫(yī),2014,28(05):353-355.