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細胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌,、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等）,，使之生存,、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法,。

 
動物細胞培養(yǎng)

動物細胞培養(yǎng)（animal cell culture）就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,，將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養(yǎng)基中,，讓這些細胞生長和增殖,。

將動物各種組織從機體中取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法處理,，分散成單細胞,，在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存,、生長和繁殖,，這一過程稱原代培養(yǎng)。當細胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,，細胞才能繼續(xù)生長,，這一過程就叫傳代。

植物細胞培養(yǎng)

植物細胞培養(yǎng)是在離體條件下,，將愈傷組織或其他易分散的組織置于 液體培養(yǎng)基中進行震蕩培養(yǎng),，得到分散成游離 的懸浮細胞，通過繼代培養(yǎng)使 細胞增殖,，從而獲得大量細胞群體,。

微生物細胞培養(yǎng)

微生物培養(yǎng)所培養(yǎng)的微生物通常是病菌、細菌,、放線菌,、真菌等。微生物多為單細胞生物,，野生生存條件比較簡單,。所以微生物人工培養(yǎng)的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養(yǎng)比好氧微生物復(fù)雜,，因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度,，而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養(yǎng)條件要求不如動植物細胞那樣苛刻,，玉米漿,、蛋白胨、麥芽汁,、酵母膏等成為良好的微生物天然培養(yǎng)基,。

培養(yǎng)條件

1. 無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理,，通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素,，以防被污染。此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,，以便清除代謝產(chǎn)物防止細胞代謝產(chǎn)物累積對細胞自身產(chǎn)生危害,。
2. 營養(yǎng)物質(zhì)：無機物（無機鹽、微量元素等）,，有機物（糖,、氨基酸,、促生長因子等）
3. 血清和血漿 (提供細胞生長必須的營養(yǎng)成份)
4. 溫度和pH（5±0.5℃，7.2～7.4）
5. 氣體環(huán)境（95%的空氣+5%CO?的混合氣體）

 
離體培養(yǎng)細胞與體內(nèi)細胞在營養(yǎng)要求上的主要差別：
·體外長期培養(yǎng)的細胞大多需要血漿,、血清或胚胎浸出液,。
·在體內(nèi)血液中許多活性很強的物質(zhì)只需微量即可維持營養(yǎng)的需要，而在體外培養(yǎng)時無法觀測,，量多了可能與微量的作用不同,，量少了又可能很快就被消耗掉。
·培養(yǎng)細胞是一群離體細胞,，而這些細胞有不同的營養(yǎng)要求,。這些不同的營養(yǎng)要求在體內(nèi)由其他器官和組織細胞的活動間接供給，而在培養(yǎng)基中則沒有這種供給,，也不受其他組織代謝的影響,。
·各種組織都有其特殊的營養(yǎng)要求，能適合某一種組織的培養(yǎng)基,，不一定就能適合別一種組織的細胞,，其差異有時較大。
·在體內(nèi)的細胞,，其新生與衰亡維持一種平衡,，而在體外培養(yǎng)時，細胞增殖,，體積加大，增殖速度往往高于分化速度,，新生細胞比衰亡細胞生長要快,，所以營養(yǎng)要求更高。

由此可見,，各種不同的細胞具有不同的營養(yǎng)要求,。因此，細胞營養(yǎng)的研究在組織細胞培養(yǎng)中非常重要,。凡能進入細胞中被細胞所利用,，參與細胞代謝活動和維持細胞生存的物質(zhì)均屬營養(yǎng)物質(zhì)。體外培養(yǎng)細胞的生長所需的基本營養(yǎng)物質(zhì),，除糖類,、氨基酸和脂類三大類營養(yǎng)物質(zhì)外，也需要一定量的無機鹽,、維生素和微量元素等,。為防止污染，培養(yǎng)基中還需添加一定量的抗生素,。

 
細胞培養(yǎng)中的營養(yǎng)物質(zhì)

• 水

一切營養(yǎng)物質(zhì)只有溶于水,，才易被細胞吸收,。代謝產(chǎn)物也需溶于水才能排泄。水還便于溶質(zhì)物質(zhì)的轉(zhuǎn)移,。水作為一種導(dǎo)熱體,，對生物體內(nèi)環(huán)境溫度的調(diào)節(jié)起重要作用。水中有溶解氧的存在,，可供細胞呼吸,，可維持水中有機體的生存。細胞培養(yǎng)用水必須經(jīng)過2~3次玻璃器皿蒸鎦或者用離子交換樹脂處理,。這樣的水含雜質(zhì)少,、純度高，應(yīng)用起來安全可靠,。

• 糖

細胞靠糖的氧化來獲得能量,。葡萄糖是機體活動能量的主要來源。故在培養(yǎng)基中應(yīng)加入一定濃度的葡萄糖（ 1g/100ml）,，以在生物氧化后供給細胞大量的能量,。近年證明谷氨酰胺也是碳的重要來源.葡萄糖的作用與平均細胞容積有直接的關(guān)系,而與細胞數(shù)的變化關(guān)系較小。很多健康胚胎細胞和成體細胞,，皆依賴無氧酵解來獲得能量,，有些細胞也可以經(jīng)脫氨獲得基本能量。

• 氨基酸

氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,。所有培養(yǎng)細胞需要以下12種基本氨基酸：
精氨酸,、組氨酸、異亮氨酸,、亮氨酸,、蛋氨酸、賴氨酸,、苯丙氨酸,、色氨酸、蘇氨酸,、纈氨酸,、胱氨酸及酪氨酸。另外尚須谷氨酰胺,。

• 維生素

維生素是人類及動物細胞維持生命和生長所需的一種活性物質(zhì),。許多維生素是酶的輔酶和輔基的組成部分，對細胞的代謝有重大的影響,，某些維生素缺乏,，短期可引起細胞死亡。

• 無機離子和微量元素

鈉,、鉀,、鎂,、鈣、磷,、氮等無機離子是細胞生長所必需的,，它們參與細胞的代謝，是細胞組成所需要的,。此外,，微量元素鐵、鋅,、硒等也是細胞生長需要的,。細胞培養(yǎng)時用的平衡鹽溶液主要含鈉、鉀,、鈣,、鎂等陽離子。

• 血清

血清中含有多種促進細胞生長因子,，是體外培養(yǎng)細胞所需生長因子的重要來源,。

• 促細胞生長因子

體外培養(yǎng)細胞除需要上述營養(yǎng)成分外，同樣需要促進細胞生長的激素類物質(zhì),，尤其是促細胞生長因子,。如胰島素能促使細胞利用葡萄糖和氨基酸，有促進有絲分裂作用,，對很多細胞的增殖生長均有促進作用,。氫化可的song對皮膚上皮細胞及乳腺上皮細胞增殖生長有很好的促進作用，還能提高神經(jīng)膠質(zhì)細胞和成纖維細胞的克隆形成率,。

 
細胞培養(yǎng)的應(yīng)用

1. 直接觀察活細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動,。用于細胞學、遺傳學,、免疫學、實驗醫(yī)學和腫瘤學等多種學科研究.
2. 直接觀察細胞的變化可便于攝影,。
3. 研究細胞種類如低等到高等到人類,、胚胎到成體、正常組織到腫瘤,。
4. 便于使用各種技術(shù)：相差,、熒光、電鏡,、組化,、同位素標記等方法觀察和研究細胞狀況。
5. 是分子生物學和基因工程學的研究對象,，也是其主要的組成部分,。
6. 易于施用物理,、化學生物的實驗研究。
7. 易于提供大量生物性狀相似的實驗對象,耗資少比較經(jīng)濟,。
8. 成為生物制品單克隆抗體生產(chǎn)和基因工程等的材料來源,。

營養(yǎng)物質(zhì)：

氨基酸：

維生素：

血清：

抗生素：

消化酶：

其他輔助產(chǎn)品：

耗材：