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有必要對(duì)血清進(jìn)行熱滅活嗎?

閱讀:2116      發(fā)布時(shí)間:2020-6-22
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  血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,,維生素,,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒有必要的,。盡管如此,,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子,、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響,,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。
  清熱滅活操作步驟:
 ?、龠x用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè),。
  ②對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水,。
 ?、蹨囟阮A(yù)試。對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度的準(zhǔn)確性),,放入水浴箱中,,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃,。
  ④血清滅活,。血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中,,待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí),定時(shí)30分鐘,。
 ?、荽笃垦鍦缁詈螅M(jìn)行分裝,。
 ?、薇4妗7盅b后,,抽樣做無菌試驗(yàn),,-20~-70℃保存。
  多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的,。很多場(chǎng)合下,,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力,。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩,。我們建議,對(duì)于那些對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶,,需要通過試驗(yàn)來證實(shí)其必要性,,確定滅活的適當(dāng)條件;在滅活過程中,,需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測(cè),,并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。
  

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