細(xì)胞培養(yǎng)是個(gè)辛苦活,,根本離不了人,。新冠病毒肺炎疫情之下,不知道您實(shí)驗(yàn)室里養(yǎng)的細(xì)胞可還好,?
當(dāng)然,,合理運(yùn)用細(xì)胞凍存和復(fù)蘇技術(shù)可以幫助您省心度過假期。不過也有不少小伙伴向小愛哭訴,,自己辛辛苦苦養(yǎng)的細(xì)胞凍存復(fù)蘇后失活,,復(fù)蘇出來后活著的細(xì)胞就沒幾個(gè)了……
辛辛苦苦好一陣、一夜回到解放前的感覺不好受,,那么細(xì)胞凍存復(fù)蘇后失活的原因?yàn)楹文??我們又該如何去?guī)避呢?
其實(shí)目前實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞凍存大多采用10%DMSO或甘油+10%到20%牛血清+培養(yǎng)基作為細(xì)胞凍存液,這種非玻璃化凍存的方式,,操作中我們常規(guī)會(huì)注意慢凍快融以及分階段降溫等,,但是冷凍過慢則引起細(xì)胞脫水失活,冷凍稍快又容易形成冰晶,,無論如何都難以*避免細(xì)胞損傷,。
與非玻璃化凍存相對的,細(xì)胞凍存理想的方式無疑是超快速玻璃化凍存,。
玻璃化凍存利用多種冷凍保護(hù)劑聯(lián)合形成的玻璃化冷凍保護(hù)液保護(hù)懸浮細(xì)胞,,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)外玻璃化冷凍時(shí),不會(huì)形成冰晶或只形成很微小的冰晶,,不會(huì)對細(xì)胞膜和細(xì)胞器造成損傷,。凍存細(xì)胞放-80℃冰箱24h后即可移至液氮罐長期保存。
限制細(xì)胞玻璃化凍存廣泛應(yīng)用的,,主要是其需要配置較復(fù)雜的凍存液,,且配方使用需經(jīng)優(yōu)化。這些煩心煩人的工作交給我們,,現(xiàn)在,,愛必信有心、有愛研發(fā)推出即用型無血清細(xì)胞凍存液(貨號abs9417),,無需程序降溫,,適用更廣泛的細(xì)胞類型,尤其對干細(xì)胞以及原代細(xì)胞有*的凍存效果,。生產(chǎn)過程嚴(yán)格執(zhí)行cGMP操作標(biāo)準(zhǔn),。
使用我們的細(xì)胞凍存液進(jìn)行凍存和復(fù)蘇操作相當(dāng)簡單。
1)細(xì)胞凍存操作方法:
選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞凍存,,有助于提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。
1、按照常規(guī)方法懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞收集于離心管中,。
2,、1000rpm-1500rpm,5min 離心,,棄上清液,。
3、加入適量的無血清細(xì)胞凍存液于離心管中,,推薦細(xì)胞凍存濃度為 1×106 - 1×107 cells/ml,。緩慢混合均勻,制成細(xì)胞懸液,。
4,、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示的冷凍保存管中。
5、將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱,,24h后轉(zhuǎn)入移至-196℃液氮罐長期冷凍保存,。
2)細(xì)胞復(fù)蘇操作方法:
1、從液氮罐取出凍存細(xì)胞,,立即放入 37℃水浴鍋或其他細(xì)胞復(fù)蘇設(shè)備中,,快速融化。
2,、準(zhǔn)備離心管,,加入 2 倍凍存細(xì)胞體積的細(xì)胞培養(yǎng)基,待凍存管中細(xì)胞*融化后,,將凍 存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中,。
3、1200-1500rpm 5min 離心,,棄上清,。
4、加入適量新鮮培養(yǎng)基,,使用移液管緩慢懸浮細(xì)胞,,并將細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶中,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
5、24h 后觀察細(xì)胞狀態(tài),,并更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液,。
同時(shí),我們也研發(fā)推出了治療級的無血清細(xì)胞凍存液abs9413,,內(nèi)毒素水平遠(yuǎn)低于藥典標(biāo)準(zhǔn),,助力您的哺乳動(dòng)物細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞的凍存。
如需凍存胚胎干細(xì)胞/誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(ES/iPS)更推薦使用ES/iPS細(xì)胞凍存液(abs9412),。
辛辛苦苦培養(yǎng)的細(xì)胞,,再也不會(huì)“一夜回到解放前”啦,!
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
abs9417 | 無血清細(xì)胞凍存液(科研級) | 100ml | 662 |
abs9413 | 無血清細(xì)胞凍存液(治療級) | 100ml | 1712 |
abs9412 | ES/iPS細(xì)胞凍存液 | 100ml | 1943 |
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貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
abs9411 | Xeno-Free細(xì)胞消化液 | 100ml/500ml | 336/914 |
abs9410 | 即用型基質(zhì)膠 | 100ml | 1200 |
abs9414 | 成脂檢測染液 | 100ml | 462 |
abs9416 | 成軟骨檢測染液 | 100ml | 462 |
abs9415 | 成骨檢測染液 | 100ml | 462 |
abs9413 | 無血清細(xì)胞凍存液(治療級) | 100ml | 1712 |
abs9417 | 無血清細(xì)胞凍存液(科研級) | 100ml | 662 |
abs9402 | Xeno-Free人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 | 100ml/500ml | 998/3108 |
abs9401 | Xeno-Free人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(無酚紅) | 100ml/500ml | 998/3108 |
abs9405 | 人多能干細(xì)胞分化培養(yǎng)基 | 500ml | 2289 |
abs9404 | 人多能干細(xì)胞*培養(yǎng)基 | 500ml | 3444 |
abs9403 | 人多能干細(xì)胞條件培養(yǎng)基 | 500ml | 2772 |
abs9409 | 人多能干細(xì)胞消化液 | 100ml | 305 |
abs9420 | 人脂肪干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(無酚紅) | 500ml | 2548 |
abs9419 | 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(無酚紅) | 500ml | 2548 |
abs9407 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化試劑盒 | 100ml | 1953 |
abs9418 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化試劑盒 | 100ml | 2069 |
abs9406 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化試劑盒 | 100ml | 2069 |
abs9408 | 人間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化試劑盒 | 100ml | 2541 |
abs9412 | ES/iPS細(xì)胞凍存液 | 100ml | 1943 |
愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):二抗,、標(biāo)簽抗體、對照抗體,;WB相關(guān):ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒,、組化筆,;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子,、信號通路調(diào)節(jié)劑,;血清、BSA,、蛋白酶K,、CTB、TTX,、CEE,;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒,;動(dòng)植物提取物,,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...
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