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ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒常見問題

閱讀:2238      發(fā)布時(shí)間:2019-10-30
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問題原因   方法
白色條帶黑色背景體系中HRP過量   進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記
膜上有棕色或黃色條帶
背景發(fā)亮
信號弱或無信號HRP過量,,消耗底物   進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記
抗原或抗體不足   增加抗體
   使用超級ECL
轉(zhuǎn)膜失敗   優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件
HRP 活性低   測試HRP 活性:暗室中,,將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質(zhì)工作
   溶液的試管中。 幾分鐘內(nèi),,溶液會立即發(fā)出藍(lán)光,。
高背景HRP過量,消耗底物   進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記
封閉不充分或使用了不適當(dāng)?shù)姆忾]試劑   優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件
洗滌不充分   增加洗滌時(shí)間和次數(shù)
膜過度曝光   減少曝光時(shí)間
抗原,、抗體 過量   減少抗體上樣量
抗體特異性差   優(yōu)化抗體特異性
條帶有斑點(diǎn)轉(zhuǎn)膜失敗   優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件
x射線膠片與膜之間有氣泡   去除所有氣泡后,,再曝光到膠片上
背景有斑點(diǎn)形成聚合體   使用前通過0.2um過濾器過濾hrp -偶聯(lián)物
電泳轉(zhuǎn)移過程中溫度過高   控制電泳和轉(zhuǎn)移過程中的溫度
非特異性條帶HRP-偶聯(lián)物過量   進(jìn)一步稀釋hrp -偶聯(lián)物
SDS導(dǎo)致非特異性蛋白結(jié)合   在免疫檢測過程中不要使用SDS
抗體特異性差   優(yōu)化抗體特異性

 

愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):
二抗、標(biāo)簽抗體,、對照抗體,;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker,、預(yù)制膠,;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒,;細(xì)胞因子,、信號通路調(diào)節(jié)劑;血清,、BSA,、蛋白酶K、CTB,、TTX,、CEE;凋亡試劑盒,、呼吸爆發(fā)試劑盒,;動植物提取物,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...

 

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