牛血清白蛋白是生化實驗室常用的蛋白之一,而實驗中,,可能因為它過于常見,、過于平凡而忽略了它的重要性。牛血清白蛋白(BSA),,又稱第五組分,,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,,分子量為66.430kDa,,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,,例如在westernblot中作為Blockingagent,。
牛血清白蛋白前體蛋白全長607個氨基酸。前體蛋白從N端脫去18個信號肽,,以及6個前肽,,形成含有583個氨基酸,、分子量約為66.5kDa的成熟BSA蛋白。BSA表面含有大量的酸性,、堿性氨基酸,。其中酸性氨基酸谷氨酸、天冬氨酸分別有40個,、59個,,堿性氨基酸賴氨酸、精氨酸分別有59個,、23個,。另外BSA還有35個半胱氨酸,形成17對二硫鍵,,一個游離的巰基,。
當蛋白質處于“壓力”的狀態(tài)下,如加熱,、紫外照射,、氧化、剪切力等,,蛋白質的空間折疊趨于延展,,導致內部疏水位點暴露,發(fā)生無定形聚集或者形成高結構化的淀粉樣蛋白,,從而失去生物活性,。BSA具有良好的熱穩(wěn)定性,當溫度上升至65度時,,其空間結構的變化依然是可逆的,。BSA另一個特點是能夠和許多物質形成可逆結合,特別是水溶性較差的物質,,如脂肪酸,、血紅素、膽紅素,、帶負電荷的芳香化合物等,,能夠增加其水溶性。因此,,BSA是理想的蛋白保護劑,。當酶、或抗體等蛋白質發(fā)生空間結構變化,,BSA能夠與其發(fā)生可逆結合,,形成穩(wěn)定的、可溶的高分子復合物,,防止蛋白發(fā)生無定形聚集,。另外,,溶液中的BSA能夠與容器表面結合,防止蛋白吸附在容器表面而濃度降低,。
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