日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

如果想簡(jiǎn)單,、快速地分離細(xì)胞，大家反應(yīng)肯定是密度梯度離心介質(zhì),；如果您想分離人淋巴細(xì)胞,，那當(dāng)然少不了Ficoll啦。

Ficoll是蔗糖的多聚體,，呈中性,，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過(guò)生物膜,。紅細(xì)胞,、粒細(xì)胞比重大，離心后沉于管底,；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重,，離心后漂浮于分層液的液面上,，也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中,。吸取分層液液面的細(xì)胞，就可從外周血中分離到單個(gè)核細(xì)胞,。

PBMC（Peripheral blood mononuclear cell）,，外周血單個(gè)核細(xì)胞，其細(xì)胞類型為血液中具有單個(gè)核的細(xì)胞,，主要包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等,，其中淋巴細(xì)胞占很大一部分。

愛(ài)必信淋巴細(xì)胞分離介質(zhì)Lymphocyte Separation Medium（human, Ficoll-Paque）是一種無(wú)菌的,、即用型的Ficoll-泛影酸鈉密度梯度介質(zhì),，能夠簡(jiǎn)單快速的從少量或大量的人外周血、骨髓和臍帶血中高產(chǎn)和高純度的提純淋巴細(xì)胞,。本品內(nèi)毒素水平非常低,，小于0.12EU/mL，分離所得的細(xì)胞中95%左右為單個(gè)核細(xì)胞,，細(xì)胞存活率大于90%,，回收率為60%左右。

?

Ficoll-Paque分離人外周血PBMC的示意圖：

操作protocol：

01\ 樣本準(zhǔn)備

將2mL外周血轉(zhuǎn)移到15mL離心管中,；

用等量的2mLPBS稀釋外周血,，注意吹打或顛倒混勻（如需無(wú)菌操作請(qǐng)?jiān)诔瑑襞_(tái)內(nèi)完成）；

02\ 分離步驟

在離心管中加入3mL 提前混勻的Ficoll-Paque（無(wú)菌操作請(qǐng)用注射器）,；

將稀釋好的血液樣本緩慢加在Ficoll細(xì)胞分離液上,，保證Ficoll與樣本之間界面清晰（注意不要吹打或顛倒混勻）；

離心300g,，20℃,，20min（注意要設(shè)置緩降,，不能驟停）；

輕輕移除上層分離液（血漿）,；

                                                       愛(ài)必信abs930 Ficoll-Paque分離淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)圖

03\ 洗滌淋巴細(xì)胞

吸取“白膜層”PBMC,，將其轉(zhuǎn)移到新的15mL離心管中；

加3-5倍PBS充分混勻,；

離心300g,，20℃，10min（*棄去上清,，沉淀即PBMC細(xì)胞）,；

用適量PBS重懸、進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)（當(dāng)細(xì)胞量＞10E7時(shí),，要擴(kuò)大相應(yīng)試劑用量）,；

離心300g，10min（*棄去上清）,；

備注：

（1）實(shí)驗(yàn)操作前,，先將Ficoll-Paque和血液樣本在室溫放置一段時(shí)間，保持溫度為18℃和20℃,；

（2）分離PBMC步離心的時(shí)候,，一定不能設(shè)置制動(dòng)或設(shè)置低水平的制動(dòng)，否則將分層混亂,。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息： 

愛(ài)必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨)：
二抗,、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體,；WB相關(guān)：ECL發(fā)光液,、預(yù)染marker、預(yù)制膠,；IHC相關(guān)：二抗試劑盒,、組化筆；IP/CoIP試劑盒,；細(xì)胞因子,、信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑；血清,、BSA,、蛋白酶K、CTB,、TTX,、CEE；凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒,；動(dòng)植物提取物,，定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...

愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司

公眾平臺(tái)：愛(ài)必信生物