中性粒細(xì)胞（PMNs）的吞噬作用在抵御細(xì)菌,、真菌等病原微生物感染過(guò)程中發(fā)揮重要作用,。吞噬作用過(guò)程包括幾個(gè)主要階段： 趨化，黏附,，內(nèi)吞,，胞內(nèi)氧依賴(lài)性（呼吸爆發(fā)）和氧非依賴(lài)性的殺傷。 正常條件下細(xì)菌感染后,，機(jī)體PMNs被激活,，PMNs吞噬和氧化功能增強(qiáng)是機(jī)體重要的天然免疫防御機(jī)制。因此通過(guò)觀(guān)察PMNs的活化狀態(tài)可以幫助了解機(jī)體細(xì)菌感染的狀況,。
愛(ài)必信（Absin）提供的試劑盒采用流式細(xì)胞儀（FMC）檢測(cè)PMNs功能,，用PMA作為刺激劑，以二氫若丹明作為熒光底物,。中性粒細(xì)胞受刺激后產(chǎn)生反應(yīng)性氧化物,，氧化二氫若丹明為可發(fā)出熒光的若丹明123。這個(gè)反應(yīng)可以由溶血素終止,。產(chǎn)生的反應(yīng)性氧化物可以用熒光強(qiáng)度來(lái)表示,。PMNs活化和機(jī)體的天 然免疫能力,。可用于研究在各種病理情況下如感染,、自身免疫疾病,、應(yīng)急、腫瘤,、手術(shù)等中中性粒細(xì)胞的功能改變及藥物的效果評(píng)價(jià),。該試劑盒不僅用于人，還可以用于小鼠,、大鼠,、兔、狗,、牛等其他種屬,。
操作步驟：
1. 無(wú)菌肝素抗凝的全血50ul，加刺激劑（如PMA）50ul, 37°C 孵育15分鐘,。
2．加二氫若丹明25ul, 37°C避光孵育5分鐘
3．溶血素用無(wú)菌去離子水1：10稀釋?zhuān)酉♂尯蟮娜苎?ml ,，室溫避光溶血15分鐘
4．PBS洗滌2次,1500rpm離心5分鐘，去上清液
5．加0.5mlPBS重懸細(xì)胞,，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例圖：
圖1前向角,、側(cè)向角點(diǎn)狀圖譜 圖2 靜止、活化中性粒細(xì)胞FL1熒光柱狀圖譜
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