Western Blot （WB）即蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)。是將蛋白樣本通過聚丙烯酰胺電泳按分子量大小分離,，再轉(zhuǎn)移到雜交膜（blot）上,，然后通過一抗/二抗復(fù)合物對(duì)靶蛋白進(jìn)行特異性檢測(cè)的方法。WB是進(jìn)行蛋白質(zhì)分析zui流行和成熟的技術(shù)之一,。本篇討論Western Blot實(shí)驗(yàn)中關(guān)于蛋白marker的常見問題分析,，有助于成功完成WB。
1.蛋白marker為什么跑的條帶不清楚,？
答：首先確認(rèn)膠的濃度,、PH值，離子強(qiáng)度是不是正常,，這些都會(huì)影響條帶的質(zhì)量,。其次確定電泳液的PH,、離子強(qiáng)度是否正確，如甘氨酸濃度太低時(shí),，蛋白會(huì)濃縮不好,；電泳液新鮮配制。
2.為什么蛋白marker總是跑得比其他樣品慢,？
答：你的蛋白marker跑得比其他指示劑慢,，可能只是因?yàn)樗麄兊碾娪舅俣炔灰粯樱皇且粋€(gè)公司生產(chǎn)的,，選擇愛必信一籃子采購(gòu)就可以避免這樣的問題了,。
3.為什么轉(zhuǎn)膜時(shí)marker不清楚？
答：在western Blot過程中,，蛋白Marker就像個(gè)螺絲釘一樣雖然是個(gè)小細(xì)節(jié),，然而就是這樣一個(gè)小細(xì)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著不可忽視的作用。這個(gè) Western Blot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對(duì)應(yīng)的分子量大小,，只有標(biāo)準(zhǔn)量無誤了,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果才有說服力，除此之外,，蛋白標(biāo)準(zhǔn)還有表示轉(zhuǎn)移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用,，所以選擇正確的蛋白Marker也是western blot實(shí)驗(yàn)成功的必要條件之一。
4.怎么制作蛋白marker,？
答：少年,，你能提出這個(gè)問題是很有前途的。蛋白marker制作復(fù)雜,，愛必信有現(xiàn)成的,，*，實(shí)驗(yàn)效果*,，拿好不謝,！
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