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2025/02/13
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內(nèi)毒素（Endotoxin）是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的結(jié)構(gòu)，又被稱為脂多糖或者“熱源”,，是由菌體裂解后釋出的毒素,，單位EU/ml。內(nèi)毒素耐熱,，曾有人做過實驗,，在100℃的高溫下加熱內(nèi)毒素1小時，也不會破壞其結(jié)構(gòu),。
細(xì)胞培養(yǎng)中,，培養(yǎng)體系中可能會收到內(nèi)毒素的干擾。生物實驗室中,，內(nèi)毒素主要來自于各類配試劑所用的水,、各類培養(yǎng)基、血清及其他添加劑,、實驗器皿表面等,。
內(nèi)毒素更像是一個“隱形的刺客”，日常實驗中不顯山露水,，關(guān)鍵時刻很可能對實驗結(jié)果造成“致命一擊”,，導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏差，影響實驗穩(wěn)定性,。
內(nèi)毒素對細(xì)胞的的影響
培養(yǎng)體系中的內(nèi)毒素侵染細(xì)胞后,，會影響細(xì)胞的生長繁殖，可能會引起細(xì)胞型態(tài)的改變,，導(dǎo)致細(xì)胞收縮,；也可能會引發(fā)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致信號通路的改變,；還有可能影響蛋白的表達(dá)調(diào)控,。
此前，有人做過實驗,，來觀察內(nèi)毒素對細(xì)胞培養(yǎng)的影響,，記錄的影響包括：刺激白細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生組織因子、激活鼠巨噬細(xì)胞,，以及通過低水平的內(nèi)毒素抑制鼠類紅細(xì)胞集落形成等一系列指標(biāo),。
從現(xiàn)有的研究可以看出，內(nèi)毒素對于細(xì)胞培養(yǎng)影響還是很大的：改變細(xì)胞外形,、活化細(xì)胞,、產(chǎn)生訊息傳遞物質(zhì)、抑制酶活性,、抑制人工受精的成功率等,。
血清中內(nèi)毒素含量過高，更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”,，造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),，或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化,、甚至死亡,，導(dǎo)致試驗中斷失敗。所以要盡量選擇內(nèi)毒素低的血清,。
Ausbian血清
血清可能會成為細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，內(nèi)毒素的來源，因此,，在選擇血清時,，要重點關(guān)注內(nèi)毒素指標(biāo)。
以下幾類情況更應(yīng)關(guān)注內(nèi)毒素的影響：
1,、養(yǎng)干細(xì)胞時,，干細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,，干細(xì)胞很容易死亡,。
2、養(yǎng)免疫細(xì)胞時,，過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,，抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。
3,、基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實驗,，培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,，都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,，謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時,，選擇極低的內(nèi)毒素（最好≤1EU/ml）,，對實驗至關(guān)重要。
4,、原代培養(yǎng),、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染,，或者肝細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增,，這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持,。因此,，挑選更低的內(nèi)毒素，是保證實驗順利的第一步,。
5,、實驗室有些細(xì)胞，需要長期培養(yǎng),、長期凍存,，或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,，血清會經(jīng)?；蜷L時間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,，都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,，以避免內(nèi)毒素長久對細(xì)胞的毒性影響。
Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,，所有血清出廠前,，均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控，每個批次附有詳細(xì)完整的《檢測報告》,，對內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)及含量有明確的標(biāo)識,，精選內(nèi)毒素≤3EU/ml的批次，降低對細(xì)胞的影響,。
