培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的情況先排查一下原因,。
可能原因:由于更換不同培養(yǎng)液或血清,;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必須成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞,;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng),;接種細(xì)胞起始濃度太低,;細(xì)胞已老化,;支原體污染。
解決方法:比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配置培養(yǎng)液,,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子,;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),,如發(fā)現(xiàn)污染,,丟棄培養(yǎng)物;血清需保存在-20℃,。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存,。含血清培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完,;增加接種細(xì)胞起始濃度,;換用新的保種細(xì)胞;分離培養(yǎng)物,,檢測(cè)支原體,。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,,丟棄培養(yǎng)物或使用支原體清除試劑,。