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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中支原體污染是較為麻煩的問題,，困擾著很多科研人。今天跟大家分享的是實(shí)驗(yàn)室支原體檢測(cè)方法,。

培養(yǎng)法：使用支原體肉湯培養(yǎng)基接種待測(cè)樣品（細(xì)胞培養(yǎng)上清等）,，經(jīng)過約7-21天的培養(yǎng),，觀察有無支原體的生長，以此來判斷細(xì)胞培養(yǎng)基中有無支原體存在,。該方法雖然經(jīng)濟(jì)可靠，但實(shí)驗(yàn)周期較長,，所以常用來進(jìn)行對(duì)懷疑細(xì)胞的最后甄別,。

熒光指示細(xì)胞法：該方法較為快捷，方法簡(jiǎn)單,，但其靈敏度有一定的欠缺,，易造成漏檢。

PCR法：PCR 法檢測(cè)支原體的方法最為快速,、靈敏,、取樣量少，既可做細(xì)胞本身,，也可做細(xì)胞上清的檢測(cè),，同時(shí)可以檢測(cè)多種支原體的污染，是目前常用的檢測(cè)手段,。但其成本較高,，條件要求嚴(yán)格，且有時(shí)易出現(xiàn)假陽性或假陰性,。彌補(bǔ)的方法是對(duì)懷疑的樣品要經(jīng)過3 次PCR 檢測(cè),，或用培養(yǎng)法檢測(cè)。

DNA染色法：使用DNA染色試劑（如：Hoechst 33258）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,，由于支原體中的核酸也可以被著色，所以,，如果有支原體污染,，會(huì)在細(xì)胞表面或者培養(yǎng)基中見到大小不等、不規(guī)則的熒光著色顆粒,，與細(xì)胞核呈現(xiàn)的橢圓形,、更大更亮熒光形成鮮明對(duì)比。

不同的實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)具體情況選擇不同的方法或幾種方法聯(lián)合使用以保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度,。