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更新時(shí)間:2025-03-14 08:18:56
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支原體熒光定量PCR檢測試劑盒(qPCR經(jīng)典法)
Venor®Gem qEP
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支原體熒光定量PCR檢測試劑盒(qPCR經(jīng)典法)特點(diǎn): |
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1. 內(nèi)控對照為獨(dú)立包裝,,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程,。
2. 高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細(xì)胞的支原體物種(包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體),。與細(xì)菌和真核DNA無交叉反應(yīng),。
3. 高靈敏度,檢測限可達(dá)到≤10CFU/ml,。
4. 有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA,,便于特異性驗(yàn)證。
5.有相應(yīng)配套的支原體定量標(biāo)準(zhǔn)品,,便于后定量檢測,。
操作步驟
第1步:樣本處理
a.細(xì)胞培養(yǎng)上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
說明:①樣品基質(zhì)可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度,。
②細(xì)胞培養(yǎng)物樣本含豐富的DNA酶,,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度,。建議:樣本做DNA 抽提處理,,實(shí)現(xiàn)高靈敏度。
推薦:德國MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒
Venor® Gem Sample Preparation Kit
該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過廣泛驗(yàn)證,。
第2步:試劑制備
a. 凍干粉溶解
b. 反應(yīng)體系制備
b1) 樣品為細(xì)胞上清篩查——反應(yīng)體系制備
b2) 樣品為生物藥——反應(yīng)體系制備
第3步:啟動(dòng)熒光定量PCR儀
第4步:結(jié)果判別
FAM通道:檢測支原體熒光信號,。HEX通道:檢測內(nèi)控對照熒光信號。
支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制,。
支原體DNA越多,,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低,。
定量需基于Ct值和DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果,。
示意圖:
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)