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A-72現(xiàn)貨供應(yīng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
資源名稱 A-72現(xiàn)貨供應(yīng)
種屬 犬癌細(xì)胞
類型 成纖維細(xì)胞
形態(tài) 成纖維狀
提供形式 P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%RPMI-1640+10%FBS
生長(zhǎng)條件 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
生長(zhǎng)特性 貼壁
存儲(chǔ)條件 50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
詳細(xì)說明
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,,再放入液氮槽期儲(chǔ)存,。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些,。
A-72現(xiàn)貨供應(yīng)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們,。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子等,。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),;如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次,。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和公司技術(shù)部溝通交流,。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用,。CAS9005-84-9 可溶性淀粉 100g
CAS9006-59-1 卵清蛋白 10g
CAS9006-59-1 卵清蛋白 10g
CAS9006-59-1 卵清蛋白 10g
CAS9007-34-5 膠原蛋白Ⅰ型 1g
CAS9007-34-5 膠原蛋白Ⅰ型 1g
CAS9007-34-5 膠原蛋白Ⅰ型 1g
CAS9007-43-6 細(xì)胞色素 C 100mg
CAS9007-43-6 細(xì)胞色素 C 100mg
CAS9007-43-6 細(xì)胞色素 C 100mg
A-72現(xiàn)貨供應(yīng)現(xiàn)貨供應(yīng),,質(zhì)量有保證、*,、實(shí)驗(yàn)效果好,,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書,、規(guī)格,、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,,歡迎前來選購(gòu),!
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