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TE-10現(xiàn)貨供應(yīng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱
TE-10現(xiàn)貨供應(yīng)
種屬 人食管癌細(xì)胞
類(lèi)型 食管癌
提供形式 P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%DMEM+10%FBS
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
詳細(xì)說(shuō)明
動(dòng)物種別 人
供應(yīng)限制 暫不供應(yīng)
描述 ***
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降
1-3℃至–80℃以下,,再放入液氮槽期儲(chǔ)存,。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些,。
TE-10現(xiàn)貨供應(yīng)注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),,隔天再取出觀察,。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流,。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用。130643-500 烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶 500U
18-0570-48 唾液酸測(cè)試盒 ( 帶 SA 標(biāo)準(zhǔn) ) 48 T
130907-50 脫脂奶粉 ( 雜交 ) 50g
CAS9003-98-9 脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 ) 25mg
131047-5 脫氧膽酸鈉 5g
CAS302-95-4 脫氧膽酸鈉 10g
CAS83-44-3 脫氧膽酸 10g
CAS14375-45-2 脫落酸 25mg
140596-100 兔抗山羊 IgG(H+L),,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 100 μL
131152-300 兔抗雞 IgY,,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 300μL
100202-100 兔抗 His 標(biāo)簽多抗,,HRP 標(biāo)記 100μL
120534-20 兔抗 GST 標(biāo)簽多抗 20μL
CAS51005-14-2 兔肌動(dòng)蛋白 1mg
CAS9005-65-6 吐溫 -80 100mL
CAS9005-67-8 吐溫 -60 500mL
CAS9005-64-5 吐溫 -20 100mL
70603-100 土壤腐殖酸清除劑 100mL
90704-50 土壤 RNAout 50 次
60701-30 土壤 DNAout 30 次
60701-100 土壤 DNAout 100 次
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