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MM96L*操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
資源名稱
MM96L*
種屬 人黑色素瘤細胞
提供形式 P4-5代T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%高糖DMEM+10%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度
生長特性 貼壁生長
存儲條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
詳細說明
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存,。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降
1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存,。-20℃不可超過1小時,,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,,但存活率稍微降低一些。
MM96L*注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們,。
2. 仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng),,隔天再取出觀察,。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,,如果證實細胞活力正常,,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,,請拍下照片及時和我們,,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件,。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流,。
6. 該細胞只能用于科研,,不得用于臨床應用。CAS50-81-7 抗壞血酸 25g
CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g
CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g
CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g
CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg
CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg
CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg
CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g
CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g
CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
CAS504-15-4 苔黑素 5g
CAS504-15-4 苔黑素 5g
CAS504-15-4 苔黑素 5g
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
CAS50-01-1 鹽酸胍 100g
CAS50-01-1 鹽酸胍 100g
CAS50-01-1 鹽酸胍 100g
CAS493-52-7 甲基紅 5g
CAS493-52-7 甲基紅 5g
CAS493-52-7 甲基紅 5g
CAS485-47-2 茚三酮 10g
CAS485-47-2 茚三酮 10g
CAS485-47-2 茚三酮 10g
CAS477-73-6 番紅 O 5g
CAS477-73-6 番紅 O 5g
CAS477-73-6 番紅 O 5g
CAS4618-18-2 乳果糖 1g
CAS4618-18-2 乳果糖 1g
CAS4618-18-2 乳果糖 1g
CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g
CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g
CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g
CAS4431-00-9 金精三羧酸 5g
CAS4431-00-9 金精三羧酸 5g
CAS4431-00-9 金精三羧酸 5g
CAS4404-43-7 熒光增白劑 28 1g
CAS4404-43-7 熒光增白劑 28 1g
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