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HBRP3-12*操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
資源名稱 HBRP3-12*
種屬 小鼠7
形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生長特性 半貼壁生長
詳細(xì)說明
描述 該細(xì)胞屬保藏,,其特征特性尚未公開。
傳代情況 C8
支原體檢測 陰性
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,,再放入液氮槽期儲存,。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些,。
HBRP3-12*注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們,。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察,。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),;如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次,。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,,不得用于臨床應(yīng)用,。CAS7240-90-6 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷 100mg
CAS7240-90-6 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷 100mg
CAS7220-79-3 次(亞)甲基蘭 10g
CAS7220-79-3 次(亞)甲基蘭 10g
CAS7220-79-3 次(亞)甲基蘭 10g
CAS72-19-5 L- 蘇氨酸 25g
CAS72-19-5 L- 蘇氨酸 25g
CAS72-19-5 L- 蘇氨酸 25g
CAS72-18-4 L- 纈氨酸 10g
CAS72-18-4 L- 纈氨酸 10g
CAS72-18-4 L- 纈氨酸 10g
CAS71-44-3 精胺 1g
CAS71-44-3 精胺 1g
CAS71-44-3 精胺 1g
CAS71-30-7 胞嘧啶 5g
CAS71-30-7 胞嘧啶 5g
CAS71-30-7 胞嘧啶 5g
CAS7114-03-6 甲基綠 1g
CAS7114-03-6 甲基綠 1g
CAS7114-03-6 甲基綠 1g
CAS71010-52-1 植物凝膠 100g
CAS71010-52-1 植物凝膠 100g
CAS71010-52-1 植物凝膠 100g
CAS71-00-1 L- 組氨酸 25g
CAS71-00-1 L- 組氨酸 25g
CAS71-00-1 L- 組氨酸 25g
CAS7048-04-6 L- 鹽酸半胱氨酸 25g
CAS7048-04-6 L- 鹽酸半胱氨酸 25g
CAS7048-04-6 L- 鹽酸半胱氨酸 25g
CAS70-26-8 L- 鳥氨酸 5g
CAS70-26-8 L- 鳥氨酸 5g
CAS70-26-8 L- 鳥氨酸 5g
CAS70-18-8 L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 5g
CAS70-18-8 L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 5g
CAS70-18-8 L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 5g
CAS70024-90-7 人血清白蛋白 V 500mg
CAS70024-90-7 人血清白蛋白 V 500mg
CAS70024-90-7 人血清白蛋白 V 500mg
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