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資源名稱 PyQW20104E3*
種屬  小鼠7

形態(tài)  淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

生長(zhǎng)特性  半貼壁生長(zhǎng)

詳細(xì)說(shuō)明

描述  該細(xì)胞屬專保藏，其特征特性尚未公開,。

傳代情況  C2

支原體檢測(cè)  陰性

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存,。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,，但存活率稍微降低一些。
PyQW20104E3*操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。
PyQW20104E3*注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),，隔天再取出觀察,。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次,。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流,。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,，不得用于臨床應(yīng)用。
CM-H119人腦膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

香荊芥酚    0.15ml    含量測(cè)定    111691-200501
甘油三油酸酯    0.15ml    含量測(cè)定    111692-200501
甘油三亞油酸酯    0.15ml    含量測(cè)定    111693-201002
十七碳酸甲酯    20mg    含量測(cè)定    111694-200501
槐角苷    20mg    含量測(cè)定    111695-200501
蓮心堿高氯酸鹽    20mg    含量測(cè)定    111696-200501
鴨腳樹葉堿    20mg    含量測(cè)定    111697-200802
異阿魏酸    20mg    含量測(cè)定    111698-200602
高良姜素    20mg    含量測(cè)定    111699-200501
梣酮    20mg    含量測(cè)定    111700-200602
白楊素    20mg    含量測(cè)定    111701-200501