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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-20 20:07:28瀏覽次數(shù):212次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D) |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
cPLA2delta; Cytosolic phospholipase A2 delta 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預(yù)測分子量:42.8kDa 實際分子量:43kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Pro9~Leu120 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:- 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白 | Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D) | Homo sapiens (Human,,人) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human USO1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human RAB3D宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human igf-2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human EIF2B1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
PPP4C產(chǎn)品名稱: 磷suan酯酶-2Ac抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Rabbit
Chordin產(chǎn)品名稱: 原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
POTEA產(chǎn)品名稱: 腫/睪丸抗原家族104成員3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
RNF20產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白20抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
應(yīng)用類型: Other英文名稱: PDPK1英文別名: 3 Phosphoisitide Dependent Protein Kinase 1; hPDK 1; hPDK 1; PDK 1; PkB kinase; PkB kinase like gene 1; PkB like 1; PDPK1_HUMAN.
應(yīng)用類型: 英文名稱: MUC6英文別名: Gastric mucin 6 ; Gastric Mucin ; Gastric mucin-6 ; MUC 6 ; MUC-6 ; Muc6 ; MUC6 Fragment ; MUC6 mucin ; MUC6 mucin Fragment ; MUC6_HUMAN ; Mucin 6 ; Mucin 6 gastric ; Mucin 6 oligomeric mucus/gel forming ; Mucin glycoprotein Fragment ; Mucin-6 ; Secretory mucin MUC6 Fragment .
GDNF產(chǎn)品名稱: 膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
ETS1產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子家族ETS1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
應(yīng)用類型: Other /英文名稱: Thyroid Transcription Factor-1英文別名: AV026640; BCH; Benign chorea; BHC; Homeobox protein NK 2 homolog A; Homeobox protein NK-2 homolog A; Homeobox protein Nkx 2.1; Homeobox protein Nkx-2.1; Homeobox protein Nkx2.1; NK 2; NK 2 homolog A; NK2; NK2 homeobox 1; NK2, drosophila, homolog of, A; NK2.1, mouse, homolog of; Nkx 2 1; NKX 2.1; NKX 2A; NKX2 1; Nkx2-1; NKX2.1; NKX21_HUMAN; NKX2A; T EBP; T/EBP; TEBP; Thyroid nuclear factor 1; Thyroid nuclear factor; Thyroid specific enhancer binding protein; Thyroid transcription factor 1; Tin man; Tinman; TITF 1; TITF1; TTF 1; TTF-1
VAX1產(chǎn)品名稱: 視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白人真核細胞延伸因子2(eEF2)ELISA試劑盒eEF2真核細胞延伸因子2elisa檢測試劑盒Human elongation factor 2,eEF2 ELISA Kit
人真核起始因子4A-II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)ELISA試劑盒EIF4A2/DDX2B/EIF4F真核起始因子4A-IIelisa kitHuman Eukaryotic initiation factor 4A-II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)ELISA kit
人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒eIF3a真核翻譯起始因子3aELISA試劑盒Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit
人長效甲狀腺刺激素(LATS)ELISA試劑盒LATS長效甲狀腺刺激素elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human Long acting thyroid stimulator,LATS ELISA Kit
人張力蛋白4(TNS4)ELISA試劑盒TNS4張力蛋白4elisa檢測試劑盒Human TNS4 ELISA Kit
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作
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