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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白,、重組蛋白>>重組蛋白/RP>> 高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-20 19:39:00瀏覽次數(shù):188次
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,,人)
英文名稱:Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)
HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌, 細胞質(zhì) 預(yù)測分子量:47.2kDa 實際分子量:47kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Gly204~Leu364 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:6.6 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點:
標記:標記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標記方法。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,,其應(yīng)用范圍非常廣泛,,結(jié)果即時可見、敏感性高,。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human STAT5A宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human UBA5宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant SARS-CoV-2 Nucleoprotein-N1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Coronavirus
Recombinant Chicken GH宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Chicken
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
HOXD12產(chǎn)品名稱: 同源盒蛋白D12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
ZCCHC6產(chǎn)品名稱: ZCCHC6蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit
Lin28產(chǎn)品名稱: RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CD73產(chǎn)品名稱: CD73抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
HSP90 alpha產(chǎn)品名稱: 熱休克蛋白90α單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
CAMKK2產(chǎn)品名稱: 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
EFCAB4B產(chǎn)品名稱: EFCAB4B蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit, GuineaPig
SHISA7產(chǎn)品名稱: SHISA7蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
ITGAV產(chǎn)品名稱: 整合素αV(CD51)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Paxillin產(chǎn)品名稱: 樁蛋白Paxillin抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白人組織因子(TF)ELISA試劑盒TF組織因子elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human Tissue factor,IF ELISA Kit
人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA試劑盒MICA組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因Aelisa檢測試劑盒Human major histocompatibility complex class I chain-related gene A,MICA ELISA Kit
人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒H2-K1組織相容性2-K1-K 區(qū)elisa kithuman Histocompatibility 2-K1-K region,,H2-K1 ELISA Kit
人組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA試劑盒TPS組織多肽特異性抗原ELISA試劑盒Human tissue polypeptide specific antigen,TPS ELISA Kit
人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒Cath Ab組織蛋白酶抗體elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human Cathepsin Antibodies,Cath Ab ELISA Kit
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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