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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 腦轉(zhuǎn)移;;KP-N-NS
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所 在 地上海市
更新時間:2022-03-21 21:03:49瀏覽次數(shù):248次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YS-02X9880 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。
5)細胞生長方式:上皮樣,,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng),。
產(chǎn)品名稱:腦轉(zhuǎn)移;;KP-N-NS
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9880
細胞生長實驗 :細胞生長良好,,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),,1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%,;雙抗,,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),,細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,,剛剛發(fā)生細胞融合,,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散,;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),,一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,,我從10%-90%都用過,問題不大,,個人認為10%-20%可以了,,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,,凍存液可以在處理細胞前配置,,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,,LLC細胞凍存管用棉花包好,,4度2h,-20度2h或更長,,-80度過夜,,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,,推薦使用程序降溫盒,,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,,加熱溶解,,補充水分,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好,。
VWF/FITC 熒光素標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
5-羥色胺受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體 5-HTR2B 0.1ml
SPECC1L 英文名稱: 細胞質(zhì)和紡錘體機化蛋白A抗體 0.2ml
Phospho-HER2 (Tyr1222) 英文名稱: 磷酸化HER2受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-FRS2(Tyr436) 磷酸化成纖維細胞生長因子受體底物2抗體 規(guī)格 0.1ml
CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TDP-43/TARDBP (tar DNA binding protein) Tar DNA 結合蛋白43抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
BRMS-1 癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDZK3 前列腺癌激活蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
CD29 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Telomerase Binding Protein, P23 英文名稱: 端粒酶結合蛋白P23抗體 0.1ml
CD8 alpha 英文名稱: CD8抗體 0.1ml
BRMS-1 癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Goat rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗兔IgG 0.1ml
FN3K 英文名稱: 果糖胺-3激酶抗體 0.2ml
FOSL2抗體 FOSL2 0.1ml
phospho-PAK1(pSer)/FITC 熒光素標記抗磷酸化p21激活激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 規(guī)格 0.1ml
Streptavidin/Gold 金標記鏈霉親和素(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
腦轉(zhuǎn)移;;KP-N-NS動物組織超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒,
超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒50次兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒,
紅細胞超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒,
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒50次兔子前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒,
植物超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次兔子促腎上腺皮質(zhì)素(ACTH)ELISA試劑盒,
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/裂解樣品制備試劑盒50次胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒--動物,,人
酵母/超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA試劑盒--動物,人
超氧化物歧化酶(SOD)裂解樣品制備試劑盒50次2216E瓊脂
超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50次多素B肉湯基礎(SCPB)
動物細胞/組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分離試劑盒50次血瓊脂基礎 分離培養(yǎng)(GB標準)
植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分離試劑盒50次細 菌L型分離瓊脂用于L型分離培養(yǎng)
動物細胞/組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒50次L-亮
植物組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒50次L-精L-谷鹽
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒(附標準樣)50次人柯薩奇病IgM(Cox V-IgM)ELISA試劑盒,Cox V-IgM ELISA
超氧化物歧化酶(SOD)標準曲線測定試劑盒5次人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒,PY ELISA
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