產(chǎn)品名稱(chēng)：乳腺癌細(xì)胞;BT-20

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9831

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng),，-80度過(guò)夜,，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,，很方便,，省了包棉花、4度,、-20度了,。

Zfp91/FITC 熒光素標(biāo)記白血病相關(guān)新基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Cyclin D3(C-term) 周期素D3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

血管生成素-1抗體  ANG-1 0.1ml

ZNF431 英文名稱(chēng)： 鋅指蛋白431抗體 0.2ml

DUT 英文名稱(chēng)： 脫氧尿苷三磷酸酶DUT抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Ezrin (Thr567) 磷酸化埃茲蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Cyclin D3(C-term) 周期素D3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

PGE1 人前列腺素1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CTLA-4/CD152 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Ninein/GSK3B interacting protein GSK3B相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Human Collectin ELISA Kit 人膠原凝集素 96T

TGFB4 英文名稱(chēng)： 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β4抗體 0.2ml

CELF3 英文名稱(chēng)： CELF3蛋白抗體 0.1ml

 CTLA-4/CD152 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Dog IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml

FAM156A 英文名稱(chēng)： 跨膜蛋白29抗體 0.2ml

代謝型谷受體5  GRM5 0.2ml

 Pin1/FITC 熒光素標(biāo)記肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)酶Pinl抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-SCNN1B(Ser633) 磷酸化上皮鈉通道β2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  MK IgM 兔抗猴IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
乳腺癌細(xì)胞;BT-204-惡唑甲酸乙酯PUREBRANE護(hù)手露

2-基環(huán)戊酮CLEAR & PURE潔手露

氯化磷酰膽堿鈣鹽鞋底清潔劑

蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)屏幕清潔劑（電視、電腦等）

1-溴甲基萘玻璃清潔劑（櫥窗,、大門(mén),、汽車(chē)玻璃等）

2-(4-基)乙鹽酸鹽空調(diào)清潔劑

R-聯(lián)萘酚磷酸酯臺(tái)桌清潔劑（飯桌、工作臺(tái),、學(xué)生課桌椅等）

2,6-二氯嘌呤鳥(niǎo)苷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌,。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。