產(chǎn)品名稱(chēng)：骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9711

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061），1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%；雙抗,，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò),，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛,！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線，加熱溶解,，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好,。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織,。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。
PLGF/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Bovine IgG Whole serum 羊抗IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

熱休克蛋白-70抗體  HSP-70 0.1ml

Rabbit  mouse IgG 兔抗小鼠IgG 1mg

FGFR4 英文名稱(chēng)： 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rb(Ser795) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  Bovine IgG Whole serum 羊抗IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CD82/KAI1 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh OVCA1 卵巢癌相關(guān)基因1抗體 規(guī)格 0.2ml

CFH Kit Human 人 Complement Factor H / CFH ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TNFR1 英文名稱(chēng)： 壞死因子受體1抗體 0.1ml

Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 英文名稱(chēng)： 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.1ml

 CD82/KAI1 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

SPANX 英文名稱(chēng)： /抗原11.3抗體 0.1ml

FAP1 英文名稱(chēng)： Fas相關(guān)磷酸酶1抗體 0.2ml

腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白抗體  Klf4 0.1ml

 Rad17/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) 磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Beta-Amyloid (31-35) β淀粉樣肽31-35(多肽蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg
骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2SB505124黃芪皂苷 I調(diào)料總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒

NLG919黃芪皂苷III乳制品總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒

維莫德吉(GDC0449)黃芪皂苷II肉類(lèi)總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒

Zosuquidar,；LY335979黃杞苷  蛋類(lèi)總?cè)樗岜壬ǘ繖z測(cè)試劑盒

ZSTK474黃藤素  總?cè)樗岽郎y(cè)樣品處理試劑盒

木犀草素-7-O-葡萄糖酸苷黃楊酮堿蛋類(lèi)羥丁酸比色法定量檢測(cè)試劑盒

STA-9090;STA9090茴芹內(nèi)酯蛋類(lèi)羥丁酸待測(cè)樣品處理試劑盒

赤芝酸D積雪草酸飲類(lèi)異檸檬酸比色法定量檢測(cè)試劑盒