產(chǎn)品名稱：視網(wǎng)膜上皮細胞;ARPE-19

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9535

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃,，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。

5)細胞生長方式：上皮樣,，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng),。

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清，10%,；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070）,，1%,；雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期,，細胞密度適合,，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,，而且消化時不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管,。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力,，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打,。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過,，問題不大,，個人認為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外,，凍存液可以在處理細胞前配置,，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法,，LLC細胞凍存管用棉花包好,，4度2h，-20度2h或更長,，-80度過夜,，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,，推薦使用程序降溫盒,，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫,，很方便，省了包棉花,、4度,、-20度了。

Proteasome 20S LMP7 /FITC 熒光素標記低分子質量蛋白7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  MK IgM Whole serum 兔抗猴IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

白介素2抗體  IL-2 0.1ml

Rabbit  human IgM whole serum 兔抗人IgM抗血清 1ml

FBXO2 英文名稱： F-box蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化抑制基因PTEN抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  MK IgM Whole serum 兔抗猴IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

LIF peptide 白血病抑制因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化鈣調節(jié)素抗體 規(guī)格 0.1ml

過氧化物酶阻斷劑A 10ml 推薦用于凍切片,孵育20-30分鐘.

VNN2 英文名稱： 血管非炎性蛋白2抗體 0.2ml

DHCR7 英文名稱： 7脫氫膽固醇還原酶抗體 0.2ml

 Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Slit1 英文名稱： 多重表皮生長因子樣蛋白4抗體 0.2ml

EAAT1 英文名稱： 膠質細胞谷酸運載蛋白1抗體 0.1ml

半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)  Caspase-12 0.1ml

 Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格 0.2ml

MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬細胞炎性蛋白3α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
視網(wǎng)膜上皮細胞;ARPE-19(R)-(-)-2-苯酸(>98.0%(GC)(T))亥茅酚苷環(huán)境無機磷/游離磷酸根離子比色法定量檢測試劑盒

 (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC))人參皂苷 Rb2多巴（dopamine）比色法定量檢測試劑盒

(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC))1,5-O-二咖啡?？鼘幩峤M織多巴（dopamine）比色法定量檢測試劑盒

2,3,4,6--O-苯甲?；?β-D-吡喃葡萄糖基異硫酸酯(>98.0%(HPLC))白屈菜紅堿體液多巴（dopamine）比色法定量檢測試劑盒

N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內酰(>98.0%(HPLC)(T))人參皂苷 Rf半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒

N-(2-羧基-4,5-二氯苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內酰(>98.0%(HPLC)(T))木犀草苷組織半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒

對茴香酸(>99.0%(GC)(T))冬凌草甲素血濾紙片樣品半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒

9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))地膚子皂苷 Ic體液半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內，標記劃線,，加熱溶解,，補充水分，測定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上,，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL,；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性,，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大,，蒸汽溫度就越高,。因此，在同一溫度條件下,，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后,，其蛋白質易于凝固變性,，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好,。