蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床,！

商品介紹：

相關(guān)產(chǎn)品：

透明質(zhì)酸氨基葡糖苷酶1(HYAL1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hyaluronoglucosaminidase 1 (HYAL1)Homo sapiens (Human,，人)

透明質(zhì)酸氨基葡糖苷酶2(HYAL2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hyaluronoglucosaminidase 2 (HYAL2)Mus musculus (Mouse，小鼠)

透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)Homo sapiens (Human，人)   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

注意事項：

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2,、雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時間過久會導致組織變脆,，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
MRP-L9產(chǎn)品名稱: 線粒體核糖體蛋白L9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

OAS2產(chǎn)品名稱: 2'-5'-寡苷suan合成mei2抗體交叉反應: Human, Mouse, Dog, Pig

Factor IX產(chǎn)品名稱: 凝因子9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Sheep

ANKS1B產(chǎn)品名稱: β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep

SNAP47產(chǎn)品名稱: 突觸相關(guān)蛋白SNAP47抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep

RNA polymerase II / POLR2A產(chǎn)品名稱: POLR2A單克隆抗體交叉反應: Human

SIT產(chǎn)品名稱: 跨膜接頭蛋白SIT抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep

ATPase Na+/ K+ beta 2產(chǎn)品名稱: 鈉鉀ATPmei通道蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig

human CD20/AF647產(chǎn)品名稱: AF647標記小鼠抗人CD20單克隆抗體交叉反應: 
鈣蛋白酶11(CAPN11)重組蛋白人Sesquipedalian人1蛋白(Ses1)ELISA試劑盒Ses1Sesquipedalian1蛋白elisa kitHuman Sesquipedalian 1(Ses1)ELISA Kit

人Serrate蛋白(SRRT)ELISA試劑盒SRRTSerrate蛋白ELISA試劑盒Human Serrate(SRRT)ELISA Kit

人Sentan蛋白(SNTN)ELISA試劑盒SNTNSentan蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Sentan(SNTN)ELISA Kit

人Senataxin蛋白(SETX)ELISA試劑盒SETXSenataxin蛋白elisa檢測試劑盒Human Senataxin(SETX)ELISA Kit

人Sciellin蛋白(SCEL)ELISA試劑盒SCELSciellin蛋白elisa kitHuman Sciellin(SCEL)ELISA Kit