蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床！

商品介紹：

相關產(chǎn)品：

Recombinant Human YWHAZ宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SIRT5宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SDCCAG8宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human PVALB宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2、雖然作用溫和,，但能硬化組織,，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復,，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
PRSS8產(chǎn)品名稱: 絲氨suan蛋白mei8抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

Phospho-FoxO1 (Ser256)產(chǎn)品名稱: 叉頭蛋白家族1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

Phospho-TAK1 (Ser192)產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β活化激mei1交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit

EMR2產(chǎn)品名稱: CD312抗體交叉反應: Human

SFRS9產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suanSFRS9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse

NM23A產(chǎn)品名稱: 腫基因抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

HTRA2產(chǎn)品名稱: 線粒體絲氨suan蛋白mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

Fumarase/FH產(chǎn)品名稱: 富馬suan水合mei單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

Caspase-7 p20產(chǎn)品名稱: 半胱胺suan蛋白mei-7抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit

ADGRL4產(chǎn)品名稱: EGF毒su受體7跨膜結構域蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse   

細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1(ERK1)重組蛋白人抗促卵泡su抗體(Anti FSH Ab)ELISA試劑盒Anti FSH Ab抗促卵泡su抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Anti FSH Ab ELISA Kit

人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗體ELISA試劑盒C.albicans抗白色念珠菌ELISA試劑盒Human Candida Albicans(C.albicans)IgE antibody ELISA Kit

人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒AAA抗白蛋白抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-albumin antibody,，AAA ELISA Kit

人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgG)ELISA試劑盒β2-GPI抗β2糖蛋白Ielisa檢測試劑盒Human β2-glycoprotein I(β2-GPI)antibody IgG ELISA kit

人抗α干擾su抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒IFNα-Ab抗α干擾su抗體elisa kitHuman InterferonαAntibody,IFNα-Ab ELISA Kit