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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 21:19:50瀏覽次數(shù):297次
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 6 (PSMa6 |
種屬 | Homo sapiens (Human,,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床,!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 物種 |
蛋白酶體亞基α6(PSMa6)重組蛋白 | Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 6 (PSMa6) | Homo sapiens (Human,,人) |
商品介紹:
IOTA; PROS27; p27K; 27 kDa prosomal protein; Macropain iota chain; Proteasome iota chain; Multicatalytic endopeptidase complex iota chain 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:31.1kDa 實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Met1~Asp246 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):6.3 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
胎盤(pán)蛋白13(PP13)重組蛋白R(shí)ecombinant Xanthine Dehydrogenase (XDH)
羧肽酶Z(CPZ)重組蛋白R(shí)ecombinant 3-Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MST)
羧肽酶O(CPO)重組蛋白R(shí)ecombinant 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 1 (OAS1)
羧肽酶N2(CPN2)重組蛋白R(shí)ecombinant Peroxiredoxin 1 (PRDX1)
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
PRRG1產(chǎn)品名稱(chēng): 跨膜γ羧基suan蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
N myc interactor產(chǎn)品名稱(chēng): 致基因N myc相互作用因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
AKD1產(chǎn)品名稱(chēng): 苷suan激mei結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
5D1產(chǎn)品名稱(chēng): NT5D1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Monkey
SHISA9產(chǎn)品名稱(chēng): SHISA蛋白家族9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
MEIS1產(chǎn)品名稱(chēng): 同源盒蛋白Meis1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Axin1產(chǎn)品名稱(chēng): 軸蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse
Glutaredoxin 1產(chǎn)品名稱(chēng): 谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
human CD90/Thy-1產(chǎn)品名稱(chēng): 小鼠抗人CD90單克隆抗體產(chǎn)品別名: CD7; CD90 antigen; Thy 1; Thy 1 cell surface antigen; Thy 1 membrane glycoprotein; Thy 1 membrane glycoprotein precursor; Thy 1.2; Thy-1 T-cell antigen; Thy1 antigen; Thy1 T cell antigen; Thy1.1; Thy1.2; Thymus cell antigen 1, theta; THY1_RAT;
Torsin B產(chǎn)品名稱(chēng): 扭轉(zhuǎn)蛋白B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
蛋白酶體亞基α6(PSMa6)重組蛋白小鼠因子Ⅵ(FⅥ)ELISA試劑盒FⅥ因子ⅥELISA試劑盒Mouse coagulation factor Ⅵ,FⅥ ELISA Kit
小鼠因子Ⅳ(FⅣ)ELISA試劑盒FⅣ因子Ⅳelisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse coagulation factor Ⅳ,FⅣ ELISA Kit
小鼠因子Ⅰ(FⅠ)ELISA試劑盒FⅠ因子Ⅰelisa檢測(cè)試劑盒Mouse coagulation factor Ⅰ,FⅠ ELISA Kit
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)ELISA試劑盒EV腦脊髓炎病毒elisa kitMouse encephalomyelitis virus(EV)antibody(IgG)ELISA kit
小鼠腦啡肽原B(PDYN)ELISA試劑盒PDYN腦啡肽原BELISA試劑盒Mouse Proenkephalin-B,PDYN ELISA kit
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