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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-29 10:32:08瀏覽次數(shù):269次
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分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6936 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱】莫拉氏菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Moraxella spp.
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6936
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),,擴(kuò)增效率更高。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
莫拉氏菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
Oridonin腫瘤壞死因子β檢測(cè)試劑盒20mg
H4-IIE(大鼠肝細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
狀腺球蛋白(TG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 GFER / ALR 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)
MMP8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶CAS號(hào):113791 脂氧合酶檢測(cè)試盒100THuman/人Elisa試盒3034488
Sodium Danshensu腫瘤壞死因子γ檢測(cè)試劑盒20mg
偽原薯蕷皂苷 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Pseduoprotodioscin
組蛋白H2B(H2B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 RGS5 / Regulator of G-protein signaling 5 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)
(MMP7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7CAS號(hào):113617633 總氨基檢測(cè)試盒50THuman/人Elisa試盒3034488
AR1g5g肌(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)法)SCUBE2
牛磺豬去氧膽鈉 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,國(guó)進(jìn)口 Sodium taurohyodeoxycholate hydrate 蓋囊側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
Guinea IgG (親和純化) 豚鼠IgG進(jìn)口,、原裝酰輔酶A檢測(cè)試盒25mgHuman/人Elisa試盒4774145
99%5g1g肌(Cr)檢測(cè)試劑盒(PA速率比色法)matrix metalloproteinase 2
千層紙素 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Human Axin-1小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)ELISA試劑盒,,英文名:IGF-1R ELISA Kit
Guinea IgM (親和純化) 豚鼠IgM現(xiàn)貨供應(yīng)輔酶ASH檢測(cè)試盒500mgHuman/人Elisa試盒4774145
馬卡因CCK試劑盒5mg
京尼平苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Geniposidic acid 爪哇根霉無(wú)花果曲霉變種 Aspergillus ficuum var.
Nutrient Agar250腮腺炎病IgM抗體檢測(cè)試盒5mg骨堿性酶檢測(cè)試盒N.TerminalPropeptideoftypeICollagen
莫拉氏菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒3O咖酰奎寧;3Ocaffe CAS號(hào): 327979 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
輪環(huán)藤寧;Cyclen CAS號(hào): 294906 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
龍膽山;Bellidifolin CAS號(hào): 2798256 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
麗江頭堿;Foresaconitine CAS號(hào): 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
雷公藤氯內(nèi);Tripchloroli CAS號(hào): 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
藜蘆;3,4Dimethoxyben CAS號(hào): 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
靈芝A;Ganoderic acid CAS號(hào): 81907622 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
雷公藤內(nèi);Wilforlide A CAS號(hào): 84104712 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
龍血素C;Cochinchinenin CAS號(hào): 956103790 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
龍血素B ;Loureirin B CAS號(hào): 119425900 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
龍血素A;Loureirin A CAS號(hào): 119425897 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
輪環(huán)藤堿;Cycleanine CAS號(hào): 518945 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
羅紅;Roxithromycin CAS號(hào): 80214831 規(guī)格: 200mg 訂購(gòu)|咨詢
雷公藤吉堿;Wilforgine CAS號(hào): 37239477 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
雷公藤次堿;Wilforine CAS號(hào): 11088098 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
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