公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1(ASAH1)重組蛋白   

物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (ASAH1)

AC; ASAH; PHP; PHP32; Acid Ceramidase; Acylsphingosine deacylase; Putative 32 kDa heart protein

酶與激酶

特點：

標記：標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,，將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便,、直接的標記方法。

酶標記：酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,，其應用范圍非常廣泛,，結(jié)果即時可見、敏感性高,。

熒光標記：熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光,， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,，主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。

相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human IGHG1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human NUMB宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human DNALI1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human METTL4宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達蛋白的分析,、純化、檢測

　　誘導表達成功后,，表達蛋白的分析,、純化、檢測應該順當,，按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

UCP-2產(chǎn)品名稱: 線粒體脫偶連蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit

POLG產(chǎn)品名稱: DNA聚合meiγ/DNA pol γ抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig

UBXD2產(chǎn)品名稱: UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體交叉反應: BAG2產(chǎn)品名稱: Bcl-2結(jié)合抑凋亡蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

Repetin產(chǎn)品名稱: 中間絲相關(guān)蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse

LZTR2產(chǎn)品名稱: 亮氨suan拉鏈樣轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep

ZBED4產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白BED4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse

Tyrosine Hydroxylase產(chǎn)品名稱: 酪氨suan羥化mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1(ASAH1)重組蛋白人β,β胡蘿卜su9',10'加氧mei(BCO2)ELISA試劑盒BCO2β,β胡蘿卜su9',10'加氧meielisa kitHuman BCO2 ELISA Kit

人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒α-SYNα突觸核蛋白ELISA試劑盒Human α-Synuclein,α-SYN ELISA Kit

人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒α-Laα乳清蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human α Lactalbumin,，α-La ELISA Kit

人α葡萄糖苷mei(α-Glu)ELISA試劑盒α-Gluα葡萄糖苷meielisa檢測試劑盒Human α-glucosidase,α-Glu ELISA Kit

人α-內(nèi)肽(α-EP)ELISA試劑盒α-EPα-內(nèi)肽elisa kitHuman α-Endomorphin,，α-EP ELISA Kit
操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作