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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-29 10:58:05瀏覽次數(shù):314次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號 | YSP6967 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
【產(chǎn)品名稱】蟾分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Mycobacterium xenopi
【產(chǎn)品編號】YSP6967
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測,,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測,。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
蟾分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短,;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈,。
98%100g5g二?;?姜二醇112243TroponinⅠ
H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
生長分化因子9(GDF9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)
人骨成型蛋白質(zhì)6(BMP6)Galectin 12/LGALS12 半乳糖凝集素12抗體規(guī)格:96T/48TAlphaprodine Hydrochloride CII規(guī)格:15mgCD28分子檢測試盒20mg人肝癌細(xì)胞,Bel7402細(xì)胞1x10^6cells
98%500g1g1脫10姜ghrelin
槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Sophoricoside
黃體激素(LH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 DBI / ACBD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)
BMG/ Beta2MG(Human Beta2microglobulin) ELISA Kit 人β2微球蛋白CAS號:110827 (Cy... 脯氨肽酶檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒304695316
5羧基羅丹明110(單一化合物)5mg
Ipatasertib(GDC0068) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,高選擇性的pan-Akt抑制劑 GDC-0068;RG7440 克魯斯假絲酵母 Candida krusei釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Rabbit AntiFITC Whole serum 兔抗熒光素抗血清*過氧化氫酶檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4826715
水仙甙,;異鼠李素3OβD蕓香糖苷,;異鼠李素3O蕓香糖苷5(6)羧基羅丹明110(混合物)5mg
D-(-)-奎寧 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 人防御素β103A(DEFβ103A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒,英文名:ANGPTL3 ELISA Kit
Rabbit AntiGoat IgG Whole serum 兔抗羊IgG抗血清進(jìn)口,、分裝抗雙鏈DNAIgG抗體檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒4832524
香葉木素7葡萄糖苷,;香葉木素7OβD葡萄糖苷5(6)羧基羅丹明110(混合物)5mg
人參皂苷 Rg2 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗體
Pseudomonas Isolation Agar250周期蛋白G2檢測試盒5mgκ酪蛋白檢測試盒estrogen
蟾分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒大黃素;Emodin3methy CAS號: 521619 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
大車前苷;plantamajoside CAS號: 104777686 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
丹皮;Paeonol CAS號: 552410 規(guī)格: 200mg 訂購|咨詢
大薊苷;pectolinarin CAS號: 28978021 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
橙皮油內(nèi);Auraptene CAS號: 495023 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
柴胡皂苷B1;Saikosaponin CAS號: 58558080 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蒼術(shù);Atractylon CAS號: 6989215 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
赤松素;Pinosylvin CAS號: 22139771 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷E;Progenin III CAS號: 19057671 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
橙花;Nerol CAS號: 106252 規(guī)格: 0.1ml 訂購|咨詢
長梗秦艽;Waltonitone CAS號: 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
長春瑞濱;Vinorelbine CAS號: 71486221 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
常山素;Febrifugine CAS號: 24159077 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
車葉草苷;Asperuloside CAS號: 14259451 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
草;Oxalic acid CAS號: 144627 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
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