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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-29 11:36:03瀏覽次數(shù):286次
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分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP7035 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
【產(chǎn)品名稱(chēng)】波氏奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱(chēng)】Ostertagia podjapolskyi
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7035
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線(xiàn)判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類(lèi)產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
波氏奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短,;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈,。
Bilobalide抑制素B檢測(cè)試劑盒20mg
蒼術(shù)素;Atractylodin 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):DCS
GinkgolideB穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)CLIA試劑盒 0.2ml
human similar to RIKEN cDNA 2010K09 gene ELISA KIT 人類(lèi)似RIKEN cDNA 2010K09 基CAS號(hào):10488365 抗氧化酶檢測(cè)試盒1mgHuman/人Elisa試盒30925189
GinkgolideC抑制素βA檢測(cè)試劑盒20mg
蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Aloin 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeBT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)
GinkgolideC穿心蓮提取物標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人自身免疫調(diào)節(jié)因子(Autoimmune regulator)ELISA試劑盒 0.2ml
RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) ELISA Kit 人ras同源物基家族成員bCAS號(hào):104872062 法尼基焦合酶檢測(cè)試盒5mgHuman/人Elisa試盒30925189
PI染色液5mg
CDC厭氧菌瓊脂/CDC Anaerobic Agar用于厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Fetal bovine serum(Defined FBS) BR蛋白酪氨酶1B檢測(cè)試盒20mg雌二醇檢測(cè)試盒ThyroidStimulatingHormone
97%5g100mlβ淀粉酶Lactate Dehydrogenase 3
2-乙基-1,3-己二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 2-Ethyl-1,3-hexanediol
T2素檢測(cè)試盒20mg促狀腺激素檢測(cè)試盒folliclestimulatinghormone
97%25g5gβ淀粉酶Lactate Dehydrogenase 2
胎兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
New born calf serumBR結(jié)核分枝桿菌Y干擾素檢測(cè)試盒20mg促卵泡素檢測(cè)試盒corticotropinreleasinghormone
波氏奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒臭椿 CAS號(hào): 981157 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
茶多 CAS號(hào): 84650602 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
橙黃Ⅳ CAS號(hào): 554734 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
橙黃Ⅱ CAS號(hào): 633965 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
橙黃Ⅰ CAS號(hào): 523444 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
雌 CAS號(hào): 53167 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
穿琥寧 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
白果雙黃 CAS號(hào): 521324 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
3表熊果 CAS號(hào): 989300 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
()白雀木 CAS號(hào): 642386 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
八姜黃素 CAS號(hào): 36062074 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
白楊素7葡萄糖醛苷 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
半齒澤蘭素 CAS號(hào): 855969 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
并黃素 CAS號(hào): 604591 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
巴馬亭紅堿 CAS號(hào): 16176684 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
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